武汉大学学报(医学版)
武漢大學學報(醫學版)
무한대학학보(의학판)
MEDICAL JOURNAL WUHAN UNIVERSITY
2007年
1期
21-26
,共6页
宋文冲%于皆平%曹俊%刘军%沈磊%于红刚
宋文遲%于皆平%曹俊%劉軍%瀋磊%于紅剛
송문충%우개평%조준%류군%침뢰%우홍강
胃泌素%缩胆囊素%结肠肿瘤%黏着斑激酶%P190RhoGAP
胃泌素%縮膽囊素%結腸腫瘤%黏著斑激酶%P190RhoGAP
위비소%축담낭소%결장종류%점착반격매%P190RhoGAP
目的:研究胃泌素对人结肠癌细胞P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平的影响.方法:使用胆囊收缩素2受体(CCK2R)的真核表达载体pCR3.1/CCK2R转染人结肠癌细胞株Colo320,上调胃泌素表达;使用胃泌素拮抗剂下调胃泌素表达.使用相同浓度的胃泌素(1×10-7mol/L)按时间梯度刺激细胞;采用蛋白质印迹法检测总FAK、酪氨酸磷酸化的FAK的表达情况,并确定FAK最大磷酸化时间点;以免疫沉淀和蛋白质印迹法检测FAK最大磷酸化时间点的P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平.结果:胃泌素引起FAK最大酪氨酸磷酸化作用时间点为12 h,胃泌素刺激12 h较0 h、胃泌素拮抗剂+胃泌素刺激12 h后P190RhoGAP的酪氨酸磷酸化水平明显增加.结论:P190RhoGAP为FAK的下游信号分子,酪氨酸磷酸化的P190RhoGAP在胃泌素-CCK2R-FAK信号通路引起肿瘤细胞的侵袭、浸润、转移过程中发挥重要作用.
目的:研究胃泌素對人結腸癌細胞P190RhoGAP的酪氨痠燐痠化水平的影響.方法:使用膽囊收縮素2受體(CCK2R)的真覈錶達載體pCR3.1/CCK2R轉染人結腸癌細胞株Colo320,上調胃泌素錶達;使用胃泌素拮抗劑下調胃泌素錶達.使用相同濃度的胃泌素(1×10-7mol/L)按時間梯度刺激細胞;採用蛋白質印跡法檢測總FAK、酪氨痠燐痠化的FAK的錶達情況,併確定FAK最大燐痠化時間點;以免疫沉澱和蛋白質印跡法檢測FAK最大燐痠化時間點的P190RhoGAP的酪氨痠燐痠化水平.結果:胃泌素引起FAK最大酪氨痠燐痠化作用時間點為12 h,胃泌素刺激12 h較0 h、胃泌素拮抗劑+胃泌素刺激12 h後P190RhoGAP的酪氨痠燐痠化水平明顯增加.結論:P190RhoGAP為FAK的下遊信號分子,酪氨痠燐痠化的P190RhoGAP在胃泌素-CCK2R-FAK信號通路引起腫瘤細胞的侵襲、浸潤、轉移過程中髮揮重要作用.
목적:연구위비소대인결장암세포P190RhoGAP적락안산린산화수평적영향.방법:사용담낭수축소2수체(CCK2R)적진핵표체재체pCR3.1/CCK2R전염인결장암세포주Colo320,상조위비소표체;사용위비소길항제하조위비소표체.사용상동농도적위비소(1×10-7mol/L)안시간제도자격세포;채용단백질인적법검측총FAK、락안산린산화적FAK적표체정황,병학정FAK최대린산화시간점;이면역침정화단백질인적법검측FAK최대린산화시간점적P190RhoGAP적락안산린산화수평.결과:위비소인기FAK최대락안산린산화작용시간점위12 h,위비소자격12 h교0 h、위비소길항제+위비소자격12 h후P190RhoGAP적락안산린산화수평명현증가.결론:P190RhoGAP위FAK적하유신호분자,락안산린산화적P190RhoGAP재위비소-CCK2R-FAK신호통로인기종류세포적침습、침윤、전이과정중발휘중요작용.