CAJ | 학술논문

目的:探讨Snail 在AP-1介导的肾小管上皮细胞转分化中的作用及对细胞外基质分泌的影响. 方法:将体外培养的人肾小管上皮细胞(HK2)分为正常对照组、高糖组、AP-1阻断组.细胞免疫化学法检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达,ELISA法测定培养液上清中纤连蛋白(FN)的浓度变化,用凝胶电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测HK2细胞AP-1的改变,RT-PCR法检测vimentin mRNA和Snail mRNA的表达,Western blotting检测E-cadherin的表达.结果:高糖作用HK2细胞48h后,高糖组FN浓度较正常对照组显著增加(P<0.05),而AP-1阻断组浓度显著低于高糖组(P<0.05);高糖能够刺激AP-1结合活性,AP-1阻断剂可显著抑制AP-1的活化;高糖组Snail mRNA表达水平较正常对照组显著增加(P<0.05),而AP-1阻断组其水平显著低于高糖组(P<0.05);与正常对照组相比,高糖组E-cadherin蛋白表达明显降低(P<0.05),而AP-1阻断组其水平显著高于高糖组(P<0.05);高糖组vimentin mRNA和蛋白水平明显高于正常对照组(P<0.05),而AP-1阻断组显著低于高糖组(P<0.05).结论:高糖可导致肾小管上皮细胞AP-1活化,诱导Snail表达而下调E-cadherin,同时导致vimentin蛋白的表达、细胞外基质FN的分泌增加,诱导其表型转化,参与糖尿病肾病的纤维化进程.
목적:탐토Snail 재AP-1개도적신소관상피세포전분화중적작용급대세포외기질분비적영향. 방법:장체외배양적인신소관상피세포(HK2)분위정상대조조、고당조、AP-1조단조.세포면역화학법검측E-개점단백(E-cadherin)화파형단백(vimentin)적표체,ELISA법측정배양액상청중섬련단백(FN)적농도변화,용응효전영천이솔개변분석법(EMSA)검측HK2세포AP-1적개변,RT-PCR법검측vimentin mRNA화Snail mRNA적표체,Western blotting검측E-cadherin적표체.결과:고당작용HK2세포48h후,고당조FN농도교정상대조조현저증가(P<0.05),이AP-1조단조농도현저저우고당조(P<0.05);고당능구자격AP-1결합활성,AP-1조단제가현저억제AP-1적활화;고당조Snail mRNA표체수평교정상대조조현저증가(P<0.05),이AP-1조단조기수평현저저우고당조(P<0.05);여정상대조조상비,고당조E-cadherin단백표체명현강저(P<0.05),이AP-1조단조기수평현저고우고당조(P<0.05);고당조vimentin mRNA화단백수평명현고우정상대조조(P<0.05),이AP-1조단조현저저우고당조(P<0.05).결론:고당가도치신소관상피세포AP-1활화,유도Snail표체이하조E-cadherin,동시도치vimentin단백적표체、세포외기질FN적분비증가,유도기표형전화,삼여당뇨병신병적섬유화진정.