CAJ | 학술논문

[目的]建立体外诱导骨髓间质干细胞分化的平滑肌细胞模型,探索骨髓间质干细胞分化的平滑肌细胞在动脉粥样硬化发生发展过程中的作用.[方法]采用贴壁法从SD大鼠骨髓中分离骨髓间质干细胞(BMSC),运用条件培养基诱导BMSC分化成平滑肌细胞(SMC),采用免疫荧光法分析骨髓间质干细胞及其分化后的细胞特异性标志物.羟脯氨酸测定法检测两种细胞合成细胞外基质能力,粘附和迁移实验检测两种细胞的粘附和迁移能力.[结果]①分离的BMSC呈长梭形.呈骨髓间质干细胞表型.经条件培养基诱导分化15 d后,诱导分化的细胞形态呈梭形平滑肌样.表达平滑肌细胞特异性蛋白标志物α-肌动蛋白(α-SMC)和平滑肌肌球蛋白重链1(SM-MHC1),呈平滑肌细胞表型,命名为骨髓间质干细胞分化的平滑肌细胞(BMSC-SMC).②羟脯氨酸测定结果显示,未处理BMSC-SMC合成较高量的胶原,其合成量低于VSMC的合成量,经80 mg/L ox-LDL处理72 h后,BMSC.SMC合成胶原的能力显著降低(P＜0.01).③细胞牯附实验结果发现,未处理BMSC-SMC有中等数量的细胞发生粘附,经80 mg/L ox-LDL处理1 h后,BMSC-SMC细胞粘附的数目少量增加,但两者比较差异无统计学意义(P＞0.05);经80 mg/L ox-LDL处理24 h后,BMSC-SMC细胞迁移的数目显著增多,与未处理BMSC-SMC比较,差异具有统计学意义(P＜0.01).[结论]①经条件培养基诱导培养后,骨髓干细胞表达平滑肌特异性标志物,SMα-SMC和SM-MHC1提示骨髓干细胞能成功分化成平滑肌细胞.②骨髓干细胞诱导成平滑肌细胞后,具有血管平滑肌细胞的一些生物学特征,如增殖能力和分泌胞外基质能力,同时保留了骨髓干细胞的一些生物学特征,如高迁移能力,为其在促动脉粥样硬化因素作用下.跨内皮细胞层和增殖的平滑肌细胞层迁移创造了有利的条件.
[목적]건입체외유도골수간질간세포분화적평활기세포모형,탐색골수간질간세포분화적평활기세포재동맥죽양경화발생발전과정중적작용.[방법]채용첩벽법종SD대서골수중분리골수간질간세포(BMSC),운용조건배양기유도BMSC분화성평활기세포(SMC),채용면역형광법분석골수간질간세포급기분화후적세포특이성표지물.간포안산측정법검측량충세포합성세포외기질능력,점부화천이실험검측량충세포적점부화천이능력.[결과]①분리적BMSC정장사형.정골수간질간세포표형.경조건배양기유도분화15 d후,유도분화적세포형태정사형평활기양.표체평활기세포특이성단백표지물α-기동단백(α-SMC)화평활기기구단백중련1(SM-MHC1),정평활기세포표형,명명위골수간질간세포분화적평활기세포(BMSC-SMC).②간포안산측정결과현시,미처리BMSC-SMC합성교고량적효원,기합성량저우VSMC적합성량,경80 mg/L ox-LDL처리72 h후,BMSC.SMC합성효원적능력현저강저(P＜0.01).③세포고부실험결과발현,미처리BMSC-SMC유중등수량적세포발생점부,경80 mg/L ox-LDL처리1 h후,BMSC-SMC세포점부적수목소량증가,단량자비교차이무통계학의의(P＞0.05);경80 mg/L ox-LDL처리24 h후,BMSC-SMC세포천이적수목현저증다,여미처리BMSC-SMC비교,차이구유통계학의의(P＜0.01).[결론]①경조건배양기유도배양후,골수간세포표체평활기특이성표지물,SMα-SMC화SM-MHC1제시골수간세포능성공분화성평활기세포.②골수간세포유도성평활기세포후,구유혈관평활기세포적일사생물학특정,여증식능력화분비포외기질능력,동시보류료골수간세포적일사생물학특정,여고천이능력,위기재촉동맥죽양경화인소작용하.과내피세포층화증식적평활기세포층천이창조료유리적조건.