生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2010年
7期
208-215
,共8页
陈俊%杨之帆%刘晓黎%方登科
陳俊%楊之帆%劉曉黎%方登科
진준%양지범%류효려%방등과
β-葡萄糖苷酶基因%RT-PCR%基因克隆%序列分析
β-葡萄糖苷酶基因%RT-PCR%基因剋隆%序列分析
β-포도당감매기인%RT-PCR%기인극륭%서렬분석
利用RT-PCR技术从黑曲霉菌株NRRL3135中扩增了β-葡萄糖苷酶(BGL)基因的全长cDNA序列,被命名为bgl3135(GenBank登录号:FN430671).对该基因编码的BGL进行了同源性分析并预测了其三维构象.试验结果表明,bgl3135的全长cDNA为2 598 bp,含有一个2 583 bp的开放阅读框(ORF),编码一个长度为860个氨基酸残基的蛋白质.同源性分析表明,该基因编码的蛋白与来自黑曲霉As3.350和CBS513.88的BGL(GenBank登录号分别为DQ655704和XM_001398779)的相似性最高,其氨基酸序列同源性分别达99%.参照已发表的β-葡萄糖苷酶(BGL)的氨基酸保守序列,判断本研究所克隆的bgl基因属于糖苷水解酶基因家族3的成员.三维结构预测表明,该BGL的立体构象中存在20个α-螺旋和15个β-折叠,对构成和维持酶的底物识别和催化活性位点可能起着重要作用.
利用RT-PCR技術從黑麯黴菌株NRRL3135中擴增瞭β-葡萄糖苷酶(BGL)基因的全長cDNA序列,被命名為bgl3135(GenBank登錄號:FN430671).對該基因編碼的BGL進行瞭同源性分析併預測瞭其三維構象.試驗結果錶明,bgl3135的全長cDNA為2 598 bp,含有一箇2 583 bp的開放閱讀框(ORF),編碼一箇長度為860箇氨基痠殘基的蛋白質.同源性分析錶明,該基因編碼的蛋白與來自黑麯黴As3.350和CBS513.88的BGL(GenBank登錄號分彆為DQ655704和XM_001398779)的相似性最高,其氨基痠序列同源性分彆達99%.參照已髮錶的β-葡萄糖苷酶(BGL)的氨基痠保守序列,判斷本研究所剋隆的bgl基因屬于糖苷水解酶基因傢族3的成員.三維結構預測錶明,該BGL的立體構象中存在20箇α-螺鏇和15箇β-摺疊,對構成和維持酶的底物識彆和催化活性位點可能起著重要作用.
이용RT-PCR기술종흑곡매균주NRRL3135중확증료β-포도당감매(BGL)기인적전장cDNA서렬,피명명위bgl3135(GenBank등록호:FN430671).대해기인편마적BGL진행료동원성분석병예측료기삼유구상.시험결과표명,bgl3135적전장cDNA위2 598 bp,함유일개2 583 bp적개방열독광(ORF),편마일개장도위860개안기산잔기적단백질.동원성분석표명,해기인편마적단백여래자흑곡매As3.350화CBS513.88적BGL(GenBank등록호분별위DQ655704화XM_001398779)적상사성최고,기안기산서렬동원성분별체99%.삼조이발표적β-포도당감매(BGL)적안기산보수서렬,판단본연구소극륭적bgl기인속우당감수해매기인가족3적성원.삼유결구예측표명,해BGL적입체구상중존재20개α-라선화15개β-절첩,대구성화유지매적저물식별화최화활성위점가능기착중요작용.
