O型口蹄疫病毒VP1基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立
O형구제역병독VP1기인적원핵표체급간접ELISA검측방법적건립
Prokaryotic Expression of O Type FMDV VP1 Gene and Establishment of Indirect ELISA
  • 万方数据
    动物医学进展 동물의학진전
    PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE
    2011年 5期 31-35 ,共5页

    王云龙%孙强%昌静峰%李玉林%王国强%董彩文%刘旺根%梁晓艳%孙新城

    왕운룡%손강%창정봉%리옥림%왕국강%동채문%류왕근%량효염%손신성

    口蹄疫病毒%VP1基因%原核表达%间接ELISA 口蹄疫病毒%VP1基因%原覈錶達%間接ELISA
    구제역병독%VP1기인%원핵표체%간접ELISA
    表达O型口蹄疫病毒VP1蛋白,用于O型口蹄疫病毒的检测.以质粒T234/FMDV为模板,PCR扩增VP1基因片段,构建重组质粒pET-41b/VP1,转化表达菌BL21(DE3),IPTG诱导,SDS-PAGE凝胶电泳和Western blot进行分析检测,目的蛋白经镍离子亲和层析纯化,以纯化的目的蛋白包被,建立了间接VP1-ELISA检测方法.VP1基因表达的蛋白主要以包涵体形式存在,复性后具有免疫反应性,方阵滴定法确定了包被抗原的最佳工作浓度(1 mg/L),最佳的酶结合稀释度为1:8 000,检测结果特异性好.O型口蹄疫病毒VPl基因可在表达载体pET-41b中表达,并建立了O型口蹄疫病毒检测方法.
    표체O형구제역병독VP1단백,용우O형구제역병독적검측.이질립T234/FMDV위모판,PCR확증VP1기인편단,구건중조질립pET-41b/VP1,전화표체균BL21(DE3),IPTG유도,SDS-PAGE응효전영화Western blot진행분석검측,목적단백경얼리자친화층석순화,이순화적목적단백포피,건립료간접VP1-ELISA검측방법.VP1기인표체적단백주요이포함체형식존재,복성후구유면역반응성,방진적정법학정료포피항원적최가공작농도(1 mg/L),최가적매결합희석도위1:8 000,검측결과특이성호.O형구제역병독VPl기인가재표체재체pET-41b중표체,병건립료O형구제역병독검측방법.
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