中国实验血液学杂志
中國實驗血液學雜誌
중국실험혈액학잡지
JOURNAL OF EXPERIMENTAL HEMATOLOGY
2011年
3期
738-743
,共6页
韩潇%周道斌%许彩民%杨洋%段明辉%汪玄%张洁萍%赵永强%沈悌%武永吉
韓瀟%週道斌%許綵民%楊洋%段明輝%汪玄%張潔萍%趙永彊%瀋悌%武永吉
한소%주도빈%허채민%양양%단명휘%왕현%장길평%조영강%침제%무영길
慢性病贫血%白介素6%红细胞生成素%单核细胞%前炎因子
慢性病貧血%白介素6%紅細胞生成素%單覈細胞%前炎因子
만성병빈혈%백개소6%홍세포생성소%단핵세포%전염인자
红细胞生成素(erythropoietin,EPO)是治疗慢性病贫血(anemia of chronic disease,ACD)的主要药物,通过刺激造血、抑制hepcidin和前炎症因子而改善贫血.近来发现单核细胞是hepcidin的另一来源,EPO能降低IL-6诱导的hepcidin,推测EPO可能通过降低IL-6进而抑制hepcidin的间接途径.然而,EPO降低单核细胞IL-6相应的分子生物学机制还不清楚.本研究探讨EPO对单核细胞前炎症因子的作用及其分子学机制.采用实时定量PCR 检测IL-6 mRNA和TNF-α mRNA表达,Western blot方法检测PARP-1信号分子的蛋白水平.采用1μg/ml脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激THP-1单核细胞,观察EPO不同浓度(0.5,1,2,5,10 U/ml)和作用时间(0,3,6,12,24小时)对THP-1单核细胞IL-6 mRNA、TNF-α mRNA以及PARP-1蛋白的抑制作用.加用1μg/ml或5μg/ml EPO受体(EPOR)抗体和/或3-氨基苯甲酰胺(3AB,PARP-1抑制剂),观察其对EPO的拮抗作用以及对PARP-1信号分子的影响.结果表明,1μg/ml LPS可以明显促进THP-1单核细胞IL-6和TNF-αmRNA表达.EPO可抑制LPS诱导的IL-6和TNF-αmRNA表达,且呈浓度和时间依赖性:对于IL-6 mRNA,2 U/ml EPO作用6小时的抑制作用最明显;对于TNF-αmRNA,10 U/ml EPO作用3小时的抑制作用最明显.研究发现,LPS诱导IL-6 mRNA表达升高的同时PARP-1蛋白水平也明显增加,EPO抑制IL-6 mRNA表达的同时PARP-1蛋白也下降,且2 U/ml EPO 作用6小时对IL-6和PARP-1蛋白均有明显抑制.3AB是PARP-1的直接抑制剂,EPO受体的抗体与3AB相似,可拮抗EPO对IL-6的抑制作用.结论:EPO能够抑制单核细胞IL-6和TNF-α表达,EPO可能通过降低PARP-1水平抑制IL-6的表达.
紅細胞生成素(erythropoietin,EPO)是治療慢性病貧血(anemia of chronic disease,ACD)的主要藥物,通過刺激造血、抑製hepcidin和前炎癥因子而改善貧血.近來髮現單覈細胞是hepcidin的另一來源,EPO能降低IL-6誘導的hepcidin,推測EPO可能通過降低IL-6進而抑製hepcidin的間接途徑.然而,EPO降低單覈細胞IL-6相應的分子生物學機製還不清楚.本研究探討EPO對單覈細胞前炎癥因子的作用及其分子學機製.採用實時定量PCR 檢測IL-6 mRNA和TNF-α mRNA錶達,Western blot方法檢測PARP-1信號分子的蛋白水平.採用1μg/ml脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激THP-1單覈細胞,觀察EPO不同濃度(0.5,1,2,5,10 U/ml)和作用時間(0,3,6,12,24小時)對THP-1單覈細胞IL-6 mRNA、TNF-α mRNA以及PARP-1蛋白的抑製作用.加用1μg/ml或5μg/ml EPO受體(EPOR)抗體和/或3-氨基苯甲酰胺(3AB,PARP-1抑製劑),觀察其對EPO的拮抗作用以及對PARP-1信號分子的影響.結果錶明,1μg/ml LPS可以明顯促進THP-1單覈細胞IL-6和TNF-αmRNA錶達.EPO可抑製LPS誘導的IL-6和TNF-αmRNA錶達,且呈濃度和時間依賴性:對于IL-6 mRNA,2 U/ml EPO作用6小時的抑製作用最明顯;對于TNF-αmRNA,10 U/ml EPO作用3小時的抑製作用最明顯.研究髮現,LPS誘導IL-6 mRNA錶達升高的同時PARP-1蛋白水平也明顯增加,EPO抑製IL-6 mRNA錶達的同時PARP-1蛋白也下降,且2 U/ml EPO 作用6小時對IL-6和PARP-1蛋白均有明顯抑製.3AB是PARP-1的直接抑製劑,EPO受體的抗體與3AB相似,可拮抗EPO對IL-6的抑製作用.結論:EPO能夠抑製單覈細胞IL-6和TNF-α錶達,EPO可能通過降低PARP-1水平抑製IL-6的錶達.
홍세포생성소(erythropoietin,EPO)시치료만성병빈혈(anemia of chronic disease,ACD)적주요약물,통과자격조혈、억제hepcidin화전염증인자이개선빈혈.근래발현단핵세포시hepcidin적령일래원,EPO능강저IL-6유도적hepcidin,추측EPO가능통과강저IL-6진이억제hepcidin적간접도경.연이,EPO강저단핵세포IL-6상응적분자생물학궤제환불청초.본연구탐토EPO대단핵세포전염증인자적작용급기분자학궤제.채용실시정량PCR 검측IL-6 mRNA화TNF-α mRNA표체,Western blot방법검측PARP-1신호분자적단백수평.채용1μg/ml지다당(lipopolysaccharide,LPS)자격THP-1단핵세포,관찰EPO불동농도(0.5,1,2,5,10 U/ml)화작용시간(0,3,6,12,24소시)대THP-1단핵세포IL-6 mRNA、TNF-α mRNA이급PARP-1단백적억제작용.가용1μg/ml혹5μg/ml EPO수체(EPOR)항체화/혹3-안기분갑선알(3AB,PARP-1억제제),관찰기대EPO적길항작용이급대PARP-1신호분자적영향.결과표명,1μg/ml LPS가이명현촉진THP-1단핵세포IL-6화TNF-αmRNA표체.EPO가억제LPS유도적IL-6화TNF-αmRNA표체,차정농도화시간의뢰성:대우IL-6 mRNA,2 U/ml EPO작용6소시적억제작용최명현;대우TNF-αmRNA,10 U/ml EPO작용3소시적억제작용최명현.연구발현,LPS유도IL-6 mRNA표체승고적동시PARP-1단백수평야명현증가,EPO억제IL-6 mRNA표체적동시PARP-1단백야하강,차2 U/ml EPO 작용6소시대IL-6화PARP-1단백균유명현억제.3AB시PARP-1적직접억제제,EPO수체적항체여3AB상사,가길항EPO대IL-6적억제작용.결론:EPO능구억제단핵세포IL-6화TNF-α표체,EPO가능통과강저PARP-1수평억제IL-6적표체.
