种子
種子
충자
SEED
2011年
7期
82-85
,共4页
陈宗游%史艳财%罗宝丽%邹蓉%孔德鑫%韦霄
陳宗遊%史豔財%囉寶麗%鄒蓉%孔德鑫%韋霄
진종유%사염재%라보려%추용%공덕흠%위소
块根紫金牛%ISSR-PCR%正交设计%单因素试验%优化
塊根紫金牛%ISSR-PCR%正交設計%單因素試驗%優化
괴근자금우%ISSR-PCR%정교설계%단인소시험%우화
采用正交和单因素试验设计方法,研究Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA、退火温度及循环次数对ISSR-PCR扩增效果的影响,建立块根紫金牛ISSR-PCR反应体系和扩增程序,即25 ul的体系中含Mg2+ 2.0 mmol/L,dNTP0.15 mmol/L,引物1.0μmol/L,TaqDNA聚合酶1.0U,模板DNA50ng,10×Buffer 2.5μl.适宜的扩增程序是94℃预变性5 min,94℃变性30s,56.6℃退火45s,70℃延伸2.0 min;45个循环；72℃延伸7min,4℃保存.采用正交和单因素试验可快速建立ISSR-PCR反应体系.该体系稳定、可靠,可用于块根紫金牛遗传多样性分析.
採用正交和單因素試驗設計方法,研究Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚閤酶、模闆DNA、退火溫度及循環次數對ISSR-PCR擴增效果的影響,建立塊根紫金牛ISSR-PCR反應體繫和擴增程序,即25 ul的體繫中含Mg2+ 2.0 mmol/L,dNTP0.15 mmol/L,引物1.0μmol/L,TaqDNA聚閤酶1.0U,模闆DNA50ng,10×Buffer 2.5μl.適宜的擴增程序是94℃預變性5 min,94℃變性30s,56.6℃退火45s,70℃延伸2.0 min;45箇循環；72℃延伸7min,4℃保存.採用正交和單因素試驗可快速建立ISSR-PCR反應體繫.該體繫穩定、可靠,可用于塊根紫金牛遺傳多樣性分析.
채용정교화단인소시험설계방법,연구Mg2+、dNTP、인물、TaqDNA취합매、모판DNA、퇴화온도급순배차수대ISSR-PCR확증효과적영향,건립괴근자금우ISSR-PCR반응체계화확증정서,즉25 ul적체계중함Mg2+ 2.0 mmol/L,dNTP0.15 mmol/L,인물1.0μmol/L,TaqDNA취합매1.0U,모판DNA50ng,10×Buffer 2.5μl.괄의적확증정서시94℃예변성5 min,94℃변성30s,56.6℃퇴화45s,70℃연신2.0 min;45개순배；72℃연신7min,4℃보존.채용정교화단인소시험가쾌속건립ISSR-PCR반응체계.해체계은정、가고,가용우괴근자금우유전다양성분석.
