天津医药
天津醫藥
천진의약
TIANJIN MEDICAL JOURNAL
2012年
9期
865-869
,共5页
王娟%杜芳腾%杜瑶%张吉翔
王娟%杜芳騰%杜瑤%張吉翔
왕연%두방등%두요%장길상
着色性干皮病蛋白质D组%肝肿瘤%原癌基因蛋白质c-ets-1%细胞周期蛋白依赖激酶6%转染细胞周期
著色性榦皮病蛋白質D組%肝腫瘤%原癌基因蛋白質c-ets-1%細胞週期蛋白依賴激酶6%轉染細胞週期
착색성간피병단백질D조%간종류%원암기인단백질c-ets-1%세포주기단백의뢰격매6%전염세포주기
目的:观察野生型人剪切修复基因XPD转染入人肝癌细胞SMMC-7721后,细胞内Ets-1和Cdk6基因的表达变化及对SMMC-7721肝癌细胞增殖的影响.方法:将人工合成的pEGFP-N2-XPD重组质粒通过Lipofectamine 2000TM转染SMMC-7721细胞.设重组质粒转染细胞SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD (XPD)组、空载质粒转染细胞SMMC-7721-pEGFP-N2(N2)组、脂质体组、无转染空白对照组.分别用逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)和蛋白印迹法(Western blot)检测细胞中XPD、Ets-1、Cdk6基因mRNA和蛋白质的表达量,并用流式细胞仪检测细胞周期变化,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测各组细胞的增殖活力.结果:XPD组中的XPD的mRNA和蛋白质表达较其他3组明显增高(P＜ 0.001),而Ets-1、Cdk6 mRNA和蛋白质表达较其他3组明显减少(P＜ 0.001).转染pEGFP-N2-XPD重组质粒后细胞停滞在G1期,难于进入S期.转染了野生型XPD的SMMC-7721细胞增殖能力减弱.结论:XPD基因可能通过抑制Ets-1、Cdk6基因的表达影响肝癌细胞的生长.
目的:觀察野生型人剪切脩複基因XPD轉染入人肝癌細胞SMMC-7721後,細胞內Ets-1和Cdk6基因的錶達變化及對SMMC-7721肝癌細胞增殖的影響.方法:將人工閤成的pEGFP-N2-XPD重組質粒通過Lipofectamine 2000TM轉染SMMC-7721細胞.設重組質粒轉染細胞SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD (XPD)組、空載質粒轉染細胞SMMC-7721-pEGFP-N2(N2)組、脂質體組、無轉染空白對照組.分彆用逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RTPCR)和蛋白印跡法(Western blot)檢測細胞中XPD、Ets-1、Cdk6基因mRNA和蛋白質的錶達量,併用流式細胞儀檢測細胞週期變化,四甲基偶氮唑鹽微量酶反應比色法(MTT)檢測各組細胞的增殖活力.結果:XPD組中的XPD的mRNA和蛋白質錶達較其他3組明顯增高(P＜ 0.001),而Ets-1、Cdk6 mRNA和蛋白質錶達較其他3組明顯減少(P＜ 0.001).轉染pEGFP-N2-XPD重組質粒後細胞停滯在G1期,難于進入S期.轉染瞭野生型XPD的SMMC-7721細胞增殖能力減弱.結論:XPD基因可能通過抑製Ets-1、Cdk6基因的錶達影響肝癌細胞的生長.
목적:관찰야생형인전절수복기인XPD전염입인간암세포SMMC-7721후,세포내Ets-1화Cdk6기인적표체변화급대SMMC-7721간암세포증식적영향.방법:장인공합성적pEGFP-N2-XPD중조질립통과Lipofectamine 2000TM전염SMMC-7721세포.설중조질립전염세포SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD (XPD)조、공재질립전염세포SMMC-7721-pEGFP-N2(N2)조、지질체조、무전염공백대조조.분별용역전록-취합매련반응(RTPCR)화단백인적법(Western blot)검측세포중XPD、Ets-1、Cdk6기인mRNA화단백질적표체량,병용류식세포의검측세포주기변화,사갑기우담서염미량매반응비색법(MTT)검측각조세포적증식활력.결과:XPD조중적XPD적mRNA화단백질표체교기타3조명현증고(P＜ 0.001),이Ets-1、Cdk6 mRNA화단백질표체교기타3조명현감소(P＜ 0.001).전염pEGFP-N2-XPD중조질립후세포정체재G1기,난우진입S기.전염료야생형XPD적SMMC-7721세포증식능력감약.결론:XPD기인가능통과억제Ets-1、Cdk6기인적표체영향간암세포적생장.
