中国脊柱脊髓杂志
中國脊柱脊髓雜誌
중국척주척수잡지
CHINESE JOURNAL OF SPINE AND SPINAL CORD
2012年
2期
165-170
,共6页
权鑫%叶正旭%王宇清%罗卓荆
權鑫%葉正旭%王宇清%囉卓荊
권흠%협정욱%왕우청%라탁형
脊髓损伤%原子力显微镜%神经元细胞%细胞培养%机械压力
脊髓損傷%原子力顯微鏡%神經元細胞%細胞培養%機械壓力
척수손상%원자력현미경%신경원세포%세포배양%궤계압력
目的:利用脊髓背根神经节神经元细胞体外机械压力损伤模型,探计单纯机械压力因素对背根神经节神经元细胞的损伤效应,尤其是细胞膜骨架蛋白的变化情况.方法:新生SD大鼠脊髓背根神经节神经元体外原代培养,利用多功能全自动细胞压力仪(国家实用新型专利ZL 200820030390.7),将培养细胞分为A、B、C、D四组,其中A组为未施加机械压力损伤的对照组,B、C、D组分别给予0.3mPa、0.5mPa.、0.7mPa的压力损伤10min,每组观察细胞爬片6个,于加压后培养8h取细胞爬片固定,送原子力显微镜检测,观察神经元细胞的细胞膜骨架蛋白纳米级变化情况,获取并分析胞膜表面颗粒高度分布数据及原子力显微镜图片.结果:对照组细胞膜表面平滑,无明显粗糙颗粒;0.3mPa组细胞膜表面颗粒突起较对照组增多,膜颗粒总体高度增加,局部变粗糙,胞膜上蛋白高度分布直方图峰值右移;0.5mPa组较0.3mPa组胞膜粗糙度更加明显;0.7mPa组膜表面蛋白颗粒总体高度较0.3mPa及0.5mPa组降低,粗糙颗粒减少,但出现胞膜骨架蛋白解聚与构像变化,胞膜出现孔道样改变.胞膜颗粒高度分布峰值、分布宽度及最高颗粒值的单因素方差分析显示,压力损伤各组间及损伤组与对照组均有统计学差异(P<0.01).结论:机械压力损伤因素可引起细胞膜骨架蛋白变化和表面颗粒高度变化,为压力损伤的细胞保护研究提供了实验数据.
目的:利用脊髓揹根神經節神經元細胞體外機械壓力損傷模型,探計單純機械壓力因素對揹根神經節神經元細胞的損傷效應,尤其是細胞膜骨架蛋白的變化情況.方法:新生SD大鼠脊髓揹根神經節神經元體外原代培養,利用多功能全自動細胞壓力儀(國傢實用新型專利ZL 200820030390.7),將培養細胞分為A、B、C、D四組,其中A組為未施加機械壓力損傷的對照組,B、C、D組分彆給予0.3mPa、0.5mPa.、0.7mPa的壓力損傷10min,每組觀察細胞爬片6箇,于加壓後培養8h取細胞爬片固定,送原子力顯微鏡檢測,觀察神經元細胞的細胞膜骨架蛋白納米級變化情況,穫取併分析胞膜錶麵顆粒高度分佈數據及原子力顯微鏡圖片.結果:對照組細胞膜錶麵平滑,無明顯粗糙顆粒;0.3mPa組細胞膜錶麵顆粒突起較對照組增多,膜顆粒總體高度增加,跼部變粗糙,胞膜上蛋白高度分佈直方圖峰值右移;0.5mPa組較0.3mPa組胞膜粗糙度更加明顯;0.7mPa組膜錶麵蛋白顆粒總體高度較0.3mPa及0.5mPa組降低,粗糙顆粒減少,但齣現胞膜骨架蛋白解聚與構像變化,胞膜齣現孔道樣改變.胞膜顆粒高度分佈峰值、分佈寬度及最高顆粒值的單因素方差分析顯示,壓力損傷各組間及損傷組與對照組均有統計學差異(P<0.01).結論:機械壓力損傷因素可引起細胞膜骨架蛋白變化和錶麵顆粒高度變化,為壓力損傷的細胞保護研究提供瞭實驗數據.
목적:이용척수배근신경절신경원세포체외궤계압력손상모형,탐계단순궤계압력인소대배근신경절신경원세포적손상효응,우기시세포막골가단백적변화정황.방법:신생SD대서척수배근신경절신경원체외원대배양,이용다공능전자동세포압력의(국가실용신형전리ZL 200820030390.7),장배양세포분위A、B、C、D사조,기중A조위미시가궤계압력손상적대조조,B、C、D조분별급여0.3mPa、0.5mPa.、0.7mPa적압력손상10min,매조관찰세포파편6개,우가압후배양8h취세포파편고정,송원자력현미경검측,관찰신경원세포적세포막골가단백납미급변화정황,획취병분석포막표면과립고도분포수거급원자력현미경도편.결과:대조조세포막표면평활,무명현조조과립;0.3mPa조세포막표면과립돌기교대조조증다,막과립총체고도증가,국부변조조,포막상단백고도분포직방도봉치우이;0.5mPa조교0.3mPa조포막조조도경가명현;0.7mPa조막표면단백과립총체고도교0.3mPa급0.5mPa조강저,조조과립감소,단출현포막골가단백해취여구상변화,포막출현공도양개변.포막과립고도분포봉치、분포관도급최고과립치적단인소방차분석현시,압력손상각조간급손상조여대조조균유통계학차이(P<0.01).결론:궤계압력손상인소가인기세포막골가단백변화화표면과립고도변화,위압력손상적세포보호연구제공료실험수거.