中国水产科学
中國水產科學
중국수산과학
Journal of Fishery Sciences of China
2011年
6期
1211-1218
,共8页
牙鲆%let-7%克隆与表达%变态%甲状腺激素%靶基因
牙鲆%let-7%剋隆與錶達%變態%甲狀腺激素%靶基因
아평%let-7%극륭여표체%변태%갑상선격소%파기인
let-7是时序发育过程中的重要调控因子,在促进幼体向成体转变过程中起着极其重要的作用.为探讨let-7对牙鲆(Paralichthys olivaceus)从幼体到成体转变的变态发育过程的影响,本实验对let-7进行了克隆与表达研究,并预测了其可能的靶基因.利用普通PCR技术从牙鲆中成功鉴定出let-7及其前体序列,该前体序列在不同的物种间具有高度的保守性.运用实时荧光定量RT-PCR方法分析let-7在牙鲆变态发育不同阶段的表达,结果发现,水温(16±0.5)℃条件下,在牙鲆变态发育的前5个阶段(孵化后17、20、23、29、36 d),let-7的表达量逐渐上升,在变态末期(36 dph)达到高峰,变态结束(41 dph)时表达量呈现下降的趋势.实时荧光定量数据表明,甲状腺激素(T3)上调牙鲆肾细胞中let-7的表达,在浓度为75 nmol/L时,表达量达到最高.靶基因预测发现,let-7作用于多样的靶基因,其靶基因可能参与生长发育、细胞分化、信号转导、病毒免疫等生物过程.本研究建立了let-7在牙鲆变态发育过程中的表达谱,并在细胞水平研究了T3对let-7表达量的影响,预测了其可能的靶基因,为研究let-7在牙鲆变态发育过程中的调控机制奠定了基础.
let-7是時序髮育過程中的重要調控因子,在促進幼體嚮成體轉變過程中起著極其重要的作用.為探討let-7對牙鲆(Paralichthys olivaceus)從幼體到成體轉變的變態髮育過程的影響,本實驗對let-7進行瞭剋隆與錶達研究,併預測瞭其可能的靶基因.利用普通PCR技術從牙鲆中成功鑒定齣let-7及其前體序列,該前體序列在不同的物種間具有高度的保守性.運用實時熒光定量RT-PCR方法分析let-7在牙鲆變態髮育不同階段的錶達,結果髮現,水溫(16±0.5)℃條件下,在牙鲆變態髮育的前5箇階段(孵化後17、20、23、29、36 d),let-7的錶達量逐漸上升,在變態末期(36 dph)達到高峰,變態結束(41 dph)時錶達量呈現下降的趨勢.實時熒光定量數據錶明,甲狀腺激素(T3)上調牙鲆腎細胞中let-7的錶達,在濃度為75 nmol/L時,錶達量達到最高.靶基因預測髮現,let-7作用于多樣的靶基因,其靶基因可能參與生長髮育、細胞分化、信號轉導、病毒免疫等生物過程.本研究建立瞭let-7在牙鲆變態髮育過程中的錶達譜,併在細胞水平研究瞭T3對let-7錶達量的影響,預測瞭其可能的靶基因,為研究let-7在牙鲆變態髮育過程中的調控機製奠定瞭基礎.
let-7시시서발육과정중적중요조공인자,재촉진유체향성체전변과정중기착겁기중요적작용.위탐토let-7대아평(Paralichthys olivaceus)종유체도성체전변적변태발육과정적영향,본실험대let-7진행료극륭여표체연구,병예측료기가능적파기인.이용보통PCR기술종아평중성공감정출let-7급기전체서렬,해전체서렬재불동적물충간구유고도적보수성.운용실시형광정량RT-PCR방법분석let-7재아평변태발육불동계단적표체,결과발현,수온(16±0.5)℃조건하,재아평변태발육적전5개계단(부화후17、20、23、29、36 d),let-7적표체량축점상승,재변태말기(36 dph)체도고봉,변태결속(41 dph)시표체량정현하강적추세.실시형광정량수거표명,갑상선격소(T3)상조아평신세포중let-7적표체,재농도위75 nmol/L시,표체량체도최고.파기인예측발현,let-7작용우다양적파기인,기파기인가능삼여생장발육、세포분화、신호전도、병독면역등생물과정.본연구건립료let-7재아평변태발육과정중적표체보,병재세포수평연구료T3대let-7표체량적영향,예측료기가능적파기인,위연구let-7재아평변태발육과정중적조공궤제전정료기출.
