中国社区医师（医学专业）
中國社區醫師（醫學專業）
중국사구의사（의학전업）
CHINESE COMMUNITY DOCTORS
2011年
28期
236-237
,共2页
树突状细胞%流式细胞术%混合淋巴细胞反应
樹突狀細胞%流式細胞術%混閤淋巴細胞反應
수돌상세포%류식세포술%혼합림파세포반응
目的:体外诱导、培养人外周血单个核细胞获得不同成熟阶段的树突状细胞(DCs)及其功能鉴定,为肿瘤免疫治疗提供基础.方法:密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,黏附6小时后祛除悬浮细胞,第1阶段加入含重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素-4的RPMI1640培养液诱导培养7天,获得未成熟DCs;第2阶段在重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和TNF-α联合诱导下培养至14天,获得成熟的DCs.对DCs的形态进行显微镜下观察,用流式细胞仪检测其表型,用混合淋巴细胞反应检测其刺激T细胞增殖能力.结果:获得的未成熟DCs中度表达CD1a、共刺激分子,高表达HLA-DR分子,在DCs的成熟期共刺激分子、HLA-DR及CD83、CD11c分子均高度表达,刺激同种异型T淋巴细胞增殖的能力强.结论:成功获得了诱导人外周血单个核细胞来源的大量纯度较高的DCs并验证了其抗原呈递能力.
目的:體外誘導、培養人外週血單箇覈細胞穫得不同成熟階段的樹突狀細胞(DCs)及其功能鑒定,為腫瘤免疫治療提供基礎.方法:密度梯度離心法分離人外週血單箇覈細胞,黏附6小時後祛除懸浮細胞,第1階段加入含重組人粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子和重組人白細胞介素-4的RPMI1640培養液誘導培養7天,穫得未成熟DCs;第2階段在重組人粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子和TNF-α聯閤誘導下培養至14天,穫得成熟的DCs.對DCs的形態進行顯微鏡下觀察,用流式細胞儀檢測其錶型,用混閤淋巴細胞反應檢測其刺激T細胞增殖能力.結果:穫得的未成熟DCs中度錶達CD1a、共刺激分子,高錶達HLA-DR分子,在DCs的成熟期共刺激分子、HLA-DR及CD83、CD11c分子均高度錶達,刺激同種異型T淋巴細胞增殖的能力彊.結論:成功穫得瞭誘導人外週血單箇覈細胞來源的大量純度較高的DCs併驗證瞭其抗原呈遞能力.
목적:체외유도、배양인외주혈단개핵세포획득불동성숙계단적수돌상세포(DCs)급기공능감정,위종류면역치료제공기출.방법:밀도제도리심법분리인외주혈단개핵세포,점부6소시후거제현부세포,제1계단가입함중조인립세포-거서세포집락자격인자화중조인백세포개소-4적RPMI1640배양액유도배양7천,획득미성숙DCs;제2계단재중조인립세포-거서세포집락자격인자화TNF-α연합유도하배양지14천,획득성숙적DCs.대DCs적형태진행현미경하관찰,용류식세포의검측기표형,용혼합림파세포반응검측기자격T세포증식능력.결과:획득적미성숙DCs중도표체CD1a、공자격분자,고표체HLA-DR분자,재DCs적성숙기공자격분자、HLA-DR급CD83、CD11c분자균고도표체,자격동충이형T림파세포증식적능력강.결론:성공획득료유도인외주혈단개핵세포래원적대량순도교고적DCs병험증료기항원정체능력.
