北京大学学报（医学版）
北京大學學報（醫學版）
북경대학학보（의학판）
JOURNAL OF BEIJING MEDICAL UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2010年
4期
480-484
,共5页
染色与标记%流式细胞术%DNA%细胞周期
染色與標記%流式細胞術%DNA%細胞週期
염색여표기%류식세포술%DNA%세포주기
目的:探索利用DAPI和Hoechst33342两种荧光染料检测DNA的流式细胞技术.方法:分别用DAPI、Hochest和PI 3种荧光染料标记HT-29细胞,通过流式细胞仪检测其G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比较3种方法测定结果.用标准荧光微球和DNA质量控制试剂盒做测试质控.结果:质控实验显示,紫外激光的变异系数(CV)为2.4;DAPI和Hoechst33342标记的小鸡红细胞核(chicken erythrocyte nuclei,CEN)出现4个峰,第2、第3和第4峰所在道数的平均值与第1峰的比值为2、3、4,且第1峰的CV均为2.4.DAPI、Hoechst33342标记小牛胸腺细胞核(calf thymocyte nuclei,CTN)出现2个峰,G2/G1为1.97,且GO/G1峰的CV为2.4.DAPI、Hoechst33342和PI 3种染料标记的HT-29细胞呈现完整的细胞周期峰,结果分别为CV值3.40、3.02和4.42,G0/G1期含量为60.86%、60.22%和60.81%,S期含量为28.85%、29.70%和29.82%,G2/M期含量为10.29%、9.09%和9.37%,3种标记法测定结果一致.结论:本文探索的DAPI和Hoechst33342标记法简单易行,可作为具备紫外激光器的流式细胞仪的首选DNA荧光染料.
目的:探索利用DAPI和Hoechst33342兩種熒光染料檢測DNA的流式細胞技術.方法:分彆用DAPI、Hochest和PI 3種熒光染料標記HT-29細胞,通過流式細胞儀檢測其G0/G1期、S期和G2/M期的DNA含量,比較3種方法測定結果.用標準熒光微毬和DNA質量控製試劑盒做測試質控.結果:質控實驗顯示,紫外激光的變異繫數(CV)為2.4;DAPI和Hoechst33342標記的小鷄紅細胞覈(chicken erythrocyte nuclei,CEN)齣現4箇峰,第2、第3和第4峰所在道數的平均值與第1峰的比值為2、3、4,且第1峰的CV均為2.4.DAPI、Hoechst33342標記小牛胸腺細胞覈(calf thymocyte nuclei,CTN)齣現2箇峰,G2/G1為1.97,且GO/G1峰的CV為2.4.DAPI、Hoechst33342和PI 3種染料標記的HT-29細胞呈現完整的細胞週期峰,結果分彆為CV值3.40、3.02和4.42,G0/G1期含量為60.86%、60.22%和60.81%,S期含量為28.85%、29.70%和29.82%,G2/M期含量為10.29%、9.09%和9.37%,3種標記法測定結果一緻.結論:本文探索的DAPI和Hoechst33342標記法簡單易行,可作為具備紫外激光器的流式細胞儀的首選DNA熒光染料.
목적:탐색이용DAPI화Hoechst33342량충형광염료검측DNA적류식세포기술.방법:분별용DAPI、Hochest화PI 3충형광염료표기HT-29세포,통과류식세포의검측기G0/G1기、S기화G2/M기적DNA함량,비교3충방법측정결과.용표준형광미구화DNA질량공제시제합주측시질공.결과:질공실험현시,자외격광적변이계수(CV)위2.4;DAPI화Hoechst33342표기적소계홍세포핵(chicken erythrocyte nuclei,CEN)출현4개봉,제2、제3화제4봉소재도수적평균치여제1봉적비치위2、3、4,차제1봉적CV균위2.4.DAPI、Hoechst33342표기소우흉선세포핵(calf thymocyte nuclei,CTN)출현2개봉,G2/G1위1.97,차GO/G1봉적CV위2.4.DAPI、Hoechst33342화PI 3충염료표기적HT-29세포정현완정적세포주기봉,결과분별위CV치3.40、3.02화4.42,G0/G1기함량위60.86%、60.22%화60.81%,S기함량위28.85%、29.70%화29.82%,G2/M기함량위10.29%、9.09%화9.37%,3충표기법측정결과일치.결론:본문탐색적DAPI화Hoechst33342표기법간단역행,가작위구비자외격광기적류식세포의적수선DNA형광염료.
