中国医学科学院学报
中國醫學科學院學報
중국의학과학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE SINICAE
2010年
3期
310-314
,共5页
崔冬清%孙铁英%黎建%黄秀清
崔鼕清%孫鐵英%黎建%黃秀清
최동청%손철영%려건%황수청
铜绿假单胞菌%生物被膜%氧浓度%密度感应系统%Ⅲ型分泌系统
銅綠假單胞菌%生物被膜%氧濃度%密度感應繫統%Ⅲ型分泌繫統
동록가단포균%생물피막%양농도%밀도감응계통%Ⅲ형분비계통
目的 研究氧浓度变化对铜绿假单胞菌生物被膜产生量的影响,探讨密度感应系统在生物被膜调控中的作用以及Ⅲ型分泌系统表达和生物被膜形成的关系.方法 将23株铜绿假单胞菌临床菌株在不同氧浓度环境下连续培养3 d,检测生物被膜和藻酸盐产生量,银染色法观察ATCC27853产生胞外多糖的时间窗,实时定量多聚酶链反应(PCR)测定密度感应系统中调控基因LasI和RhlI的表达,Western blot方法观察Ⅲ型分泌系统的代表毒素胞外酶S分泌情况.结果 铜绿假单胞菌的生物被膜产生量(R=0.455,P=0.000)及藻酸盐产生量(R=0.367,P=0.000)均与氧浓度变化呈显著正相关.银染色法结果显示,高氧条件下胞外多糖合成时间缩短.实时定量PCR结果显示,LasI、RhlI的相对表达量与氧浓度(R=0.025,P=0.794;R=-0.044,P=0.653)、生物被膜产生量(R=0.001,P=0.990;R=0.011,P=0.909)和藻酸盐产生量(R=0.029,P=0.770;R=0.193,P=0.064)间无明显相关性.Westem blot结果表明,铜绿假单胞菌在氧浓度为10%～30%条件下可分泌胞外酶S,在高氧条件下不分泌胞外酶S.结论 高氧可促进铜绿假单胞菌生物被膜的产生.Las系统和Rhl系统可能因为菌群数量处于低水平而未在生物被膜形成早期阶段参与生物被膜的调控过程.生物被膜的产生增多可能抑制Ⅲ型分泌系统的表达,使该菌毒力发挥受到限制.
目的 研究氧濃度變化對銅綠假單胞菌生物被膜產生量的影響,探討密度感應繫統在生物被膜調控中的作用以及Ⅲ型分泌繫統錶達和生物被膜形成的關繫.方法 將23株銅綠假單胞菌臨床菌株在不同氧濃度環境下連續培養3 d,檢測生物被膜和藻痠鹽產生量,銀染色法觀察ATCC27853產生胞外多糖的時間窗,實時定量多聚酶鏈反應(PCR)測定密度感應繫統中調控基因LasI和RhlI的錶達,Western blot方法觀察Ⅲ型分泌繫統的代錶毒素胞外酶S分泌情況.結果 銅綠假單胞菌的生物被膜產生量(R=0.455,P=0.000)及藻痠鹽產生量(R=0.367,P=0.000)均與氧濃度變化呈顯著正相關.銀染色法結果顯示,高氧條件下胞外多糖閤成時間縮短.實時定量PCR結果顯示,LasI、RhlI的相對錶達量與氧濃度(R=0.025,P=0.794;R=-0.044,P=0.653)、生物被膜產生量(R=0.001,P=0.990;R=0.011,P=0.909)和藻痠鹽產生量(R=0.029,P=0.770;R=0.193,P=0.064)間無明顯相關性.Westem blot結果錶明,銅綠假單胞菌在氧濃度為10%～30%條件下可分泌胞外酶S,在高氧條件下不分泌胞外酶S.結論 高氧可促進銅綠假單胞菌生物被膜的產生.Las繫統和Rhl繫統可能因為菌群數量處于低水平而未在生物被膜形成早期階段參與生物被膜的調控過程.生物被膜的產生增多可能抑製Ⅲ型分泌繫統的錶達,使該菌毒力髮揮受到限製.
목적 연구양농도변화대동록가단포균생물피막산생량적영향,탐토밀도감응계통재생물피막조공중적작용이급Ⅲ형분비계통표체화생물피막형성적관계.방법 장23주동록가단포균림상균주재불동양농도배경하련속배양3 d,검측생물피막화조산염산생량,은염색법관찰ATCC27853산생포외다당적시간창,실시정량다취매련반응(PCR)측정밀도감응계통중조공기인LasI화RhlI적표체,Western blot방법관찰Ⅲ형분비계통적대표독소포외매S분비정황.결과 동록가단포균적생물피막산생량(R=0.455,P=0.000)급조산염산생량(R=0.367,P=0.000)균여양농도변화정현저정상관.은염색법결과현시,고양조건하포외다당합성시간축단.실시정량PCR결과현시,LasI、RhlI적상대표체량여양농도(R=0.025,P=0.794;R=-0.044,P=0.653)、생물피막산생량(R=0.001,P=0.990;R=0.011,P=0.909)화조산염산생량(R=0.029,P=0.770;R=0.193,P=0.064)간무명현상관성.Westem blot결과표명,동록가단포균재양농도위10%～30%조건하가분비포외매S,재고양조건하불분비포외매S.결론 고양가촉진동록가단포균생물피막적산생.Las계통화Rhl계통가능인위균군수량처우저수평이미재생물피막형성조기계단삼여생물피막적조공과정.생물피막적산생증다가능억제Ⅲ형분비계통적표체,사해균독력발휘수도한제.
