生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2008年
8期
1401-1406
,共6页
孙忠科%卜歆%何湘%姜铮%王芳%赵红庆%刘大伟%袁静
孫忠科%蔔歆%何湘%薑錚%王芳%趙紅慶%劉大偉%袁靜
손충과%복흠%하상%강쟁%왕방%조홍경%류대위%원정
比较蛋白质组%果糖代谢%半定量RT-PCR%MALDI-TOF/ESI-MS/MS%果糖特异性-结合蛋白BL0033
比較蛋白質組%果糖代謝%半定量RT-PCR%MALDI-TOF/ESI-MS/MS%果糖特異性-結閤蛋白BL0033
비교단백질조%과당대사%반정량RT-PCR%MALDI-TOF/ESI-MS/MS%과당특이성-결합단백BL0033
为揭示长双歧杆菌NCC2705(Bifidobacterium longum NCC2705)果糖代谢途径,建立其果糖发酵模型.以本实验室前期构建的长双歧杆菌NCC2705菌株蛋白质参考图谱为基础,进行了果糖和葡萄糖生长的菌体比较蛋白质组学研究,利用MALDI-TOF和ESI-MS/MS鉴定差异蛋白.进一步通过半定量RT-PCR验证二者显著差异表达蛋白.果糖生长的菌体蛋白中鉴定到了所有葡萄糖降解途径中的酶和蛋白质,另外鉴定到3倍以上差异蛋白点9个,其对应的5个蛋白在果糖发酵中上调,半定量RT-PCR验证显著差异蛋白,显示在果糖发酵中具有高水平表达是ABC转运系统的果糖特异性-结合蛋白BL0033和ATP结合蛋白BL0034.果糖的发酵时间和浓度梯度试验显示诱导时间越长、浓度越高,BL0033的表达量越高.第一,比较蛋白谱证明果糖和葡萄糖以相同途径降解.第二,BL0033的表达是受果糖诱导的,果糖的吸收可能是通过一个特殊的转运系统,即ABC转运系统将果糖从胞外转运到胞内,其中BL0033和BL0034共同作为系统元件扮演了重要角色.
為揭示長雙歧桿菌NCC2705(Bifidobacterium longum NCC2705)果糖代謝途徑,建立其果糖髮酵模型.以本實驗室前期構建的長雙歧桿菌NCC2705菌株蛋白質參攷圖譜為基礎,進行瞭果糖和葡萄糖生長的菌體比較蛋白質組學研究,利用MALDI-TOF和ESI-MS/MS鑒定差異蛋白.進一步通過半定量RT-PCR驗證二者顯著差異錶達蛋白.果糖生長的菌體蛋白中鑒定到瞭所有葡萄糖降解途徑中的酶和蛋白質,另外鑒定到3倍以上差異蛋白點9箇,其對應的5箇蛋白在果糖髮酵中上調,半定量RT-PCR驗證顯著差異蛋白,顯示在果糖髮酵中具有高水平錶達是ABC轉運繫統的果糖特異性-結閤蛋白BL0033和ATP結閤蛋白BL0034.果糖的髮酵時間和濃度梯度試驗顯示誘導時間越長、濃度越高,BL0033的錶達量越高.第一,比較蛋白譜證明果糖和葡萄糖以相同途徑降解.第二,BL0033的錶達是受果糖誘導的,果糖的吸收可能是通過一箇特殊的轉運繫統,即ABC轉運繫統將果糖從胞外轉運到胞內,其中BL0033和BL0034共同作為繫統元件扮縯瞭重要角色.
위게시장쌍기간균NCC2705(Bifidobacterium longum NCC2705)과당대사도경,건립기과당발효모형.이본실험실전기구건적장쌍기간균NCC2705균주단백질삼고도보위기출,진행료과당화포도당생장적균체비교단백질조학연구,이용MALDI-TOF화ESI-MS/MS감정차이단백.진일보통과반정량RT-PCR험증이자현저차이표체단백.과당생장적균체단백중감정도료소유포도당강해도경중적매화단백질,령외감정도3배이상차이단백점9개,기대응적5개단백재과당발효중상조,반정량RT-PCR험증현저차이단백,현시재과당발효중구유고수평표체시ABC전운계통적과당특이성-결합단백BL0033화ATP결합단백BL0034.과당적발효시간화농도제도시험현시유도시간월장、농도월고,BL0033적표체량월고.제일,비교단백보증명과당화포도당이상동도경강해.제이,BL0033적표체시수과당유도적,과당적흡수가능시통과일개특수적전운계통,즉ABC전운계통장과당종포외전운도포내,기중BL0033화BL0034공동작위계통원건분연료중요각색.
