热带医学杂志
熱帶醫學雜誌
열대의학잡지
JOURNAL OF TROPICAL MEDICINE
2008年
1期
15-18
,共4页
唐启慧%田新贵%林斌%向开军%周荣
唐啟慧%田新貴%林斌%嚮開軍%週榮
당계혜%전신귀%림빈%향개군%주영
肠道病毒71型%VP1基因%克隆表达
腸道病毒71型%VP1基因%剋隆錶達
장도병독71형%VP1기인%극륭표체
目的 克隆、表达和鉴定肠道病毒71型广州株EVGZ06VP1基因部分序列,为制备抗体和基因工程疫苗打下基础.方法 在成功克隆肠道病毒71型广州株EVGZ06全长VP1蛋白基因并测序的基础上,将部分VP1蛋白基因克隆到表达载体pET28a(+)上,构建了重组表达质粒pET28a(+)/(502～891)VP1,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,利用Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用Western blotting和ELISA方法 检测其抗原性.结果 重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示其相对分子质量为19 000,与预计大小一致.ELISA和Western blotting实验证实,重组蛋白具有良好的抗原性.结论 本研究成功克隆和表达了肠道病毒71型VP1基因部分序列,为肠道病毒71型诊断试剂和疫苗的开发等进一步的研究奠定了基础.
目的 剋隆、錶達和鑒定腸道病毒71型廣州株EVGZ06VP1基因部分序列,為製備抗體和基因工程疫苗打下基礎.方法 在成功剋隆腸道病毒71型廣州株EVGZ06全長VP1蛋白基因併測序的基礎上,將部分VP1蛋白基因剋隆到錶達載體pET28a(+)上,構建瞭重組錶達質粒pET28a(+)/(502～891)VP1,轉化大腸桿菌BL21,IPTG誘導錶達,利用Ni2+親和層析柱對重組蛋白進行純化,併用Western blotting和ELISA方法 檢測其抗原性.結果 重組蛋白在大腸桿菌中可以高效錶達,SDS-PAGE顯示其相對分子質量為19 000,與預計大小一緻.ELISA和Western blotting實驗證實,重組蛋白具有良好的抗原性.結論 本研究成功剋隆和錶達瞭腸道病毒71型VP1基因部分序列,為腸道病毒71型診斷試劑和疫苗的開髮等進一步的研究奠定瞭基礎.
목적 극륭、표체화감정장도병독71형엄주주EVGZ06VP1기인부분서렬,위제비항체화기인공정역묘타하기출.방법 재성공극륭장도병독71형엄주주EVGZ06전장VP1단백기인병측서적기출상,장부분VP1단백기인극륭도표체재체pET28a(+)상,구건료중조표체질립pET28a(+)/(502～891)VP1,전화대장간균BL21,IPTG유도표체,이용Ni2+친화층석주대중조단백진행순화,병용Western blotting화ELISA방법 검측기항원성.결과 중조단백재대장간균중가이고효표체,SDS-PAGE현시기상대분자질량위19 000,여예계대소일치.ELISA화Western blotting실험증실,중조단백구유량호적항원성.결론 본연구성공극륭화표체료장도병독71형VP1기인부분서렬,위장도병독71형진단시제화역묘적개발등진일보적연구전정료기출.
