甘肃农业大学学报
甘肅農業大學學報
감숙농업대학학보
JOURNAL OF GANSU AGRICULTURAL UNIVERSITY
2007年
6期
23-27
,共5页
王笑笑%宗瑞谦%吕转萍%窦永喜%宋世斌%景志忠
王笑笑%宗瑞謙%呂轉萍%竇永喜%宋世斌%景誌忠
왕소소%종서겸%려전평%두영희%송세빈%경지충
猪白介素18%转染%BHK细胞%真核表达
豬白介素18%轉染%BHK細胞%真覈錶達
저백개소18%전염%BHK세포%진핵표체
将猪白介素18(Porcine interleukin18,PIL-18)基因亚克隆到真核表达载体pEGFP-N1中,构建了重组表达质粒pEGFP-PIL-18,利用脂质体法转染BHK细胞,采用荧光显微镜实时观察和RT-PCR检测技术确定目的蛋白的表达情况.结果在转染重组质粒24 h、48 h后的BHK细胞中均观察到绿色荧光,转染的BHK细胞经G418筛选14 d后,用RT-PCR法检测目的基因,并扩增到长576 bpd的目的cDNA片段.表明在BHK细胞中成功地表达了PIL-18与EGFP的融合蛋白,这为下一步建立稳定表达PIL-18的细胞系奠定了基础.
將豬白介素18(Porcine interleukin18,PIL-18)基因亞剋隆到真覈錶達載體pEGFP-N1中,構建瞭重組錶達質粒pEGFP-PIL-18,利用脂質體法轉染BHK細胞,採用熒光顯微鏡實時觀察和RT-PCR檢測技術確定目的蛋白的錶達情況.結果在轉染重組質粒24 h、48 h後的BHK細胞中均觀察到綠色熒光,轉染的BHK細胞經G418篩選14 d後,用RT-PCR法檢測目的基因,併擴增到長576 bpd的目的cDNA片段.錶明在BHK細胞中成功地錶達瞭PIL-18與EGFP的融閤蛋白,這為下一步建立穩定錶達PIL-18的細胞繫奠定瞭基礎.
장저백개소18(Porcine interleukin18,PIL-18)기인아극륭도진핵표체재체pEGFP-N1중,구건료중조표체질립pEGFP-PIL-18,이용지질체법전염BHK세포,채용형광현미경실시관찰화RT-PCR검측기술학정목적단백적표체정황.결과재전염중조질립24 h、48 h후적BHK세포중균관찰도록색형광,전염적BHK세포경G418사선14 d후,용RT-PCR법검측목적기인,병확증도장576 bpd적목적cDNA편단.표명재BHK세포중성공지표체료PIL-18여EGFP적융합단백,저위하일보건립은정표체PIL-18적세포계전정료기출.
