中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2007年
11期
57-60
,共4页
王海%王华茂%李锦军%石必枝%李宗海
王海%王華茂%李錦軍%石必枝%李宗海
왕해%왕화무%리금군%석필지%리종해
基因治疗%靶向性非病毒载体%阳离子多肽%原核表达纯化%DNA包装
基因治療%靶嚮性非病毒載體%暘離子多肽%原覈錶達純化%DNA包裝
기인치료%파향성비병독재체%양리자다태%원핵표체순화%DNA포장
目的:原核表达靶向性阳离子多肽(KH)20-EGF,并对其DNA包装能力进行检验.方法:构建pET28a-(KH)20-EGF原核表达载体.进行酶切和测序鉴定.转化BL21(DE3)后,经过IPTG诱导表达和NTA树脂纯化得到粗提蛋白产物,SDS-PAGE和Western blot鉴定后,将蛋白与质粒DNA混合,用于凝胶阻滞实验分析.结果:重组(KH)20-EGF的产量约为300μg/L.SDS-PAGE和Western blot表明该蛋白的凝胶迁移有些滞后;凝胶阻滞试验发现(KH)20-EGF对质粒DNA的迁移有阻滞作用.结论:成功表达非病毒载体(KH)20-EGF并确认其DNA包装能力.
目的:原覈錶達靶嚮性暘離子多肽(KH)20-EGF,併對其DNA包裝能力進行檢驗.方法:構建pET28a-(KH)20-EGF原覈錶達載體.進行酶切和測序鑒定.轉化BL21(DE3)後,經過IPTG誘導錶達和NTA樹脂純化得到粗提蛋白產物,SDS-PAGE和Western blot鑒定後,將蛋白與質粒DNA混閤,用于凝膠阻滯實驗分析.結果:重組(KH)20-EGF的產量約為300μg/L.SDS-PAGE和Western blot錶明該蛋白的凝膠遷移有些滯後;凝膠阻滯試驗髮現(KH)20-EGF對質粒DNA的遷移有阻滯作用.結論:成功錶達非病毒載體(KH)20-EGF併確認其DNA包裝能力.
목적:원핵표체파향성양리자다태(KH)20-EGF,병대기DNA포장능력진행검험.방법:구건pET28a-(KH)20-EGF원핵표체재체.진행매절화측서감정.전화BL21(DE3)후,경과IPTG유도표체화NTA수지순화득도조제단백산물,SDS-PAGE화Western blot감정후,장단백여질립DNA혼합,용우응효조체실험분석.결과:중조(KH)20-EGF적산량약위300μg/L.SDS-PAGE화Western blot표명해단백적응효천이유사체후;응효조체시험발현(KH)20-EGF대질립DNA적천이유조체작용.결론:성공표체비병독재체(KH)20-EGF병학인기DNA포장능력.
