细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2007年
11期
1061-1063
,共3页
崔城%赵鸿梅%王雁%邓欣%于秉治
崔城%趙鴻梅%王雁%鄧訢%于秉治
최성%조홍매%왕안%산흔%우병치
小鼠%cdc25B%原核表达
小鼠%cdc25B%原覈錶達
소서%cdc25B%원핵표체
目的:构建小鼠cdc25B蛋白特定序列的原核表达载体,并诱导表达谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白.方法:采用PCR方法从小鼠cdc25B野生型及位点突变型蛋白编码序列中扩增出约360个碱基的片段,构建原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导后进行融合蛋白表达.Western blot鉴定表达产物.结果:构建出带有GST标签的原核表达载体,在大肠杆菌BL21中表达出相对分子质量(Mr)为40000的重组蛋白质,经Western blot鉴定,可与GST单克隆抗体结合,发生特异性反应.结论:利用原核表达系统成功表达出小鼠cdc25B蛋白特定序列的蛋白质,为进一步探讨与其他蛋白相互作用提供了基础.
目的:構建小鼠cdc25B蛋白特定序列的原覈錶達載體,併誘導錶達穀胱甘肽巰基轉移酶(GST)融閤蛋白.方法:採用PCR方法從小鼠cdc25B野生型及位點突變型蛋白編碼序列中擴增齣約360箇堿基的片段,構建原覈錶達載體,轉化大腸桿菌BL21(DE3)菌株,經IPTG誘導後進行融閤蛋白錶達.Western blot鑒定錶達產物.結果:構建齣帶有GST標籤的原覈錶達載體,在大腸桿菌BL21中錶達齣相對分子質量(Mr)為40000的重組蛋白質,經Western blot鑒定,可與GST單剋隆抗體結閤,髮生特異性反應.結論:利用原覈錶達繫統成功錶達齣小鼠cdc25B蛋白特定序列的蛋白質,為進一步探討與其他蛋白相互作用提供瞭基礎.
목적:구건소서cdc25B단백특정서렬적원핵표체재체,병유도표체곡광감태구기전이매(GST)융합단백.방법:채용PCR방법종소서cdc25B야생형급위점돌변형단백편마서렬중확증출약360개감기적편단,구건원핵표체재체,전화대장간균BL21(DE3)균주,경IPTG유도후진행융합단백표체.Western blot감정표체산물.결과:구건출대유GST표첨적원핵표체재체,재대장간균BL21중표체출상대분자질량(Mr)위40000적중조단백질,경Western blot감정,가여GST단극륭항체결합,발생특이성반응.결론:이용원핵표체계통성공표체출소서cdc25B단백특정서렬적단백질,위진일보탐토여기타단백상호작용제공료기출.
