CAJ | 학술논문

近年来,萤火虫荧光素酶催化的生物发光反应被广泛的应用到ATP检测、细菌数目检测、环境监测和其他生物学研究之中.通过对中华黄萤荧光素酶的性质研究,发现其分子量为6 400左右,是一种非典型的Michaelis-Menten氏酶,对底物之一的ATP动力学曲线为S型.最适反应温度为20～25 ℃,对温度极其敏感,当反应温度高于30℃时,该酶的活性快速失活.该荧光素酶的最适pH=6.5.随着pH值的下降该荧光素酶生物发光的最大发射光波长没有明显的红移现象.Mg2+和Mn2+对该酶活性的激活效果比较接近,最佳的激活浓度均在1 mmol/L附近,而Ca2+最佳的激活浓度则小于1 mmol/L,且激活的效果只有Mg2+作用效果的50%左右.和Hg2+、Cd2+等离子一样,Cu2+会在一定程度上抑制该荧光素酶的活性.该酶的稳定性较差,对盐浓度和光照比较敏感,高浓度的盐类和长时间的日光照射能够使酶失活.谷胱甘肽(GSH)和二硫苏糖醇(DTT)是该酶较好的保护剂,可以提高该酶在一定时间内的稳定性,其中前者的作用效果要好于后者.
근년래,형화충형광소매최화적생물발광반응피엄범적응용도ATP검측、세균수목검측、배경감측화기타생물학연구지중.통과대중화황형형광소매적성질연구,발현기분자량위6 400좌우,시일충비전형적Michaelis-Menten씨매,대저물지일적ATP동역학곡선위S형.최괄반응온도위20～25 ℃,대온도겁기민감,당반응온도고우30℃시,해매적활성쾌속실활.해형광소매적최괄pH=6.5.수착pH치적하강해형광소매생물발광적최대발사광파장몰유명현적홍이현상.Mg2+화Mn2+대해매활성적격활효과비교접근,최가적격활농도균재1 mmol/L부근,이Ca2+최가적격활농도칙소우1 mmol/L,차격활적효과지유Mg2+작용효과적50%좌우.화Hg2+、Cd2+등리자일양,Cu2+회재일정정도상억제해형광소매적활성.해매적은정성교차,대염농도화광조비교민감,고농도적염류화장시간적일광조사능구사매실활.곡광감태(GSH)화이류소당순(DTT)시해매교호적보호제,가이제고해매재일정시간내적은정성,기중전자적작용효과요호우후자.