重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2007年
11期
1138-1142
,共5页
神经干细胞%缺氧诱导因子-1α%绿色荧光蛋白%重组腺病毒
神經榦細胞%缺氧誘導因子-1α%綠色熒光蛋白%重組腺病毒
신경간세포%결양유도인자-1α%록색형광단백%중조선병독
目的:以携带缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)及绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因的腺病毒转染大鼠神经干细胞(Neural stem cells,NSCs),观察HIF-1α和GFP在NSCs中的表达以及对NSCs生物学特性的影响,为HIF-1α基因转染的NSCs移植治疗缺血性脑血管病提供物质基础.方法:利用携带HIF-1α和GFP基因的重组腺病毒转染NSCs,相差显微镜下观察NSCs的形态及在荧光显微镜下观察NSCs及其诱导分化后的GFP表达情况;观察HIF-1α基因在NSCs中的表达;并检测NSCs的细胞活性.应用免疫荧光技术检测神经干细胞及其诱导后分化细胞的特异性蛋白巢蛋白(Nestin)、神经微丝蛋白(Neurofilament protein)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP).结果:重组腺病毒转染NSCs后外源性基因及绿色荧光蛋白有持续稳定表达;转染后的NSCs的形态学、细胞活性和分化能力等与未转染的NSCs无明显差异(P＞0.05);检测神经元标志物神经微丝蛋白和胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白,证实转染后的NSCs仍然具有多向分化潜能.结论:NSCs转染携带HIF-1α和GFP基因的重组腺病毒后能够持续、稳定地表达HIF-1α和GFP,生物学特征正常.
目的:以攜帶缺氧誘導因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)及綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因的腺病毒轉染大鼠神經榦細胞(Neural stem cells,NSCs),觀察HIF-1α和GFP在NSCs中的錶達以及對NSCs生物學特性的影響,為HIF-1α基因轉染的NSCs移植治療缺血性腦血管病提供物質基礎.方法:利用攜帶HIF-1α和GFP基因的重組腺病毒轉染NSCs,相差顯微鏡下觀察NSCs的形態及在熒光顯微鏡下觀察NSCs及其誘導分化後的GFP錶達情況;觀察HIF-1α基因在NSCs中的錶達;併檢測NSCs的細胞活性.應用免疫熒光技術檢測神經榦細胞及其誘導後分化細胞的特異性蛋白巢蛋白(Nestin)、神經微絲蛋白(Neurofilament protein)和膠質纖維痠性蛋白(GFAP).結果:重組腺病毒轉染NSCs後外源性基因及綠色熒光蛋白有持續穩定錶達;轉染後的NSCs的形態學、細胞活性和分化能力等與未轉染的NSCs無明顯差異(P＞0.05);檢測神經元標誌物神經微絲蛋白和膠質細胞標誌物膠質纖維痠性蛋白,證實轉染後的NSCs仍然具有多嚮分化潛能.結論:NSCs轉染攜帶HIF-1α和GFP基因的重組腺病毒後能夠持續、穩定地錶達HIF-1α和GFP,生物學特徵正常.
목적:이휴대결양유도인자-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)급록색형광단백(Green fluorescent protein,GFP)기인적선병독전염대서신경간세포(Neural stem cells,NSCs),관찰HIF-1α화GFP재NSCs중적표체이급대NSCs생물학특성적영향,위HIF-1α기인전염적NSCs이식치료결혈성뇌혈관병제공물질기출.방법:이용휴대HIF-1α화GFP기인적중조선병독전염NSCs,상차현미경하관찰NSCs적형태급재형광현미경하관찰NSCs급기유도분화후적GFP표체정황;관찰HIF-1α기인재NSCs중적표체;병검측NSCs적세포활성.응용면역형광기술검측신경간세포급기유도후분화세포적특이성단백소단백(Nestin)、신경미사단백(Neurofilament protein)화효질섬유산성단백(GFAP).결과:중조선병독전염NSCs후외원성기인급록색형광단백유지속은정표체;전염후적NSCs적형태학、세포활성화분화능력등여미전염적NSCs무명현차이(P＞0.05);검측신경원표지물신경미사단백화효질세포표지물효질섬유산성단백,증실전염후적NSCs잉연구유다향분화잠능.결론:NSCs전염휴대HIF-1α화GFP기인적중조선병독후능구지속、은정지표체HIF-1α화GFP,생물학특정정상.
