中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2006年
2期
139-142
,共4页
刘启威%李群良%蔡海波%谭文松
劉啟威%李群良%蔡海波%譚文鬆
류계위%리군량%채해파%담문송
CD34+细胞%差异表达%体外培养
CD34+細胞%差異錶達%體外培養
CD34+세포%차이표체%체외배양
目的筛选扩增培养前后脐血CD34+细胞差异表达基因.方法将新鲜分离的CD34+细胞设为对照组,经静态和动态培养系统扩增的CD34+细胞设为试验组,应用基因差异显示技术(DDRT-PCR)比较两组之间的基因表达差异,对差异表达基因片段进行克隆、测序及生物信息学分析,并且通过半定量RT-PCR方法验证基因差异表达的真实性.结果应用差异显示技术筛选出5个差异表达基因,其中4个为已知功能基因,1个为未知功能基因,对其中2个基因RAN和DC24进行半定量RT-PCR检测表明,在静态和动态体系扩增培养后的CD34+细胞内,RAN mRNA的表达水平分别是新鲜分离细胞的1.521和3.978倍,DC24 mRNA的表达水平分别是新鲜分离CD34+细胞的14.275和2.374倍.结论发现了与CD34+细胞体外增殖相关的一些重要基因,为从基因水平调控CD34+细胞体外增殖提供依据.
目的篩選擴增培養前後臍血CD34+細胞差異錶達基因.方法將新鮮分離的CD34+細胞設為對照組,經靜態和動態培養繫統擴增的CD34+細胞設為試驗組,應用基因差異顯示技術(DDRT-PCR)比較兩組之間的基因錶達差異,對差異錶達基因片段進行剋隆、測序及生物信息學分析,併且通過半定量RT-PCR方法驗證基因差異錶達的真實性.結果應用差異顯示技術篩選齣5箇差異錶達基因,其中4箇為已知功能基因,1箇為未知功能基因,對其中2箇基因RAN和DC24進行半定量RT-PCR檢測錶明,在靜態和動態體繫擴增培養後的CD34+細胞內,RAN mRNA的錶達水平分彆是新鮮分離細胞的1.521和3.978倍,DC24 mRNA的錶達水平分彆是新鮮分離CD34+細胞的14.275和2.374倍.結論髮現瞭與CD34+細胞體外增殖相關的一些重要基因,為從基因水平調控CD34+細胞體外增殖提供依據.
목적사선확증배양전후제혈CD34+세포차이표체기인.방법장신선분리적CD34+세포설위대조조,경정태화동태배양계통확증적CD34+세포설위시험조,응용기인차이현시기술(DDRT-PCR)비교량조지간적기인표체차이,대차이표체기인편단진행극륭、측서급생물신식학분석,병차통과반정량RT-PCR방법험증기인차이표체적진실성.결과응용차이현시기술사선출5개차이표체기인,기중4개위이지공능기인,1개위미지공능기인,대기중2개기인RAN화DC24진행반정량RT-PCR검측표명,재정태화동태체계확증배양후적CD34+세포내,RAN mRNA적표체수평분별시신선분리세포적1.521화3.978배,DC24 mRNA적표체수평분별시신선분리CD34+세포적14.275화2.374배.결론발현료여CD34+세포체외증식상관적일사중요기인,위종기인수평조공CD34+세포체외증식제공의거.
