生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2005年
5期
482-484
,共3页
时令%王友亮%程萱%候宁%杨晓
時令%王友亮%程萱%候寧%楊曉
시령%왕우량%정훤%후저%양효
Ⅱ型肺上皮细胞%Cre重组酶%表面活性蛋白A启动子%转基因小鼠
Ⅱ型肺上皮細胞%Cre重組酶%錶麵活性蛋白A啟動子%轉基因小鼠
Ⅱ형폐상피세포%Cre중조매%표면활성단백A계동자%전기인소서
Ⅱ型肺上皮细胞合成和分泌肺表面活性物质(PS),与肺损伤后的修复有关,很多肺相关疾病的发生伴随有Ⅱ型肺上皮细胞功能不全及PS系统缺陷.Ⅱ型肺上皮细胞在肺的发育、机体免疫及疾病的发生发展过程中的具体功能尚不明确,对调控Ⅱ型肺上皮细胞功能的遗传机制也知之甚少.为了利用Cre-loxP系统研究调节Ⅱ型肺上皮细胞功能的遗传机制,研制了表面活性蛋白A(SP-A)启动子指导Cre重组酶基因在转基因小鼠Ⅱ型肺上皮细胞中表达的转基因小鼠.将整合有Cre重组酶基因的首建者小鼠与Smad4条件基因打靶小鼠及ROSA26报告小鼠交配,利用基因组PCR和LacZ染色检测Cre重组酶表达的组织分布及其体内介导loxP位点间重组的活性.多组织基因组PCR显示Cre重组酶在转基因小鼠肺、脑和消化道组织中表达.LacZ染色显示仅在Ⅱ型肺上皮细胞中检测到Cre重组酶的活性.以上结果表明本研究研制的pSP-A-Cre转基因小鼠可用于在Ⅱ型肺上皮细胞中进行条件基因打靶和细胞谱系分析.
Ⅱ型肺上皮細胞閤成和分泌肺錶麵活性物質(PS),與肺損傷後的脩複有關,很多肺相關疾病的髮生伴隨有Ⅱ型肺上皮細胞功能不全及PS繫統缺陷.Ⅱ型肺上皮細胞在肺的髮育、機體免疫及疾病的髮生髮展過程中的具體功能尚不明確,對調控Ⅱ型肺上皮細胞功能的遺傳機製也知之甚少.為瞭利用Cre-loxP繫統研究調節Ⅱ型肺上皮細胞功能的遺傳機製,研製瞭錶麵活性蛋白A(SP-A)啟動子指導Cre重組酶基因在轉基因小鼠Ⅱ型肺上皮細胞中錶達的轉基因小鼠.將整閤有Cre重組酶基因的首建者小鼠與Smad4條件基因打靶小鼠及ROSA26報告小鼠交配,利用基因組PCR和LacZ染色檢測Cre重組酶錶達的組織分佈及其體內介導loxP位點間重組的活性.多組織基因組PCR顯示Cre重組酶在轉基因小鼠肺、腦和消化道組織中錶達.LacZ染色顯示僅在Ⅱ型肺上皮細胞中檢測到Cre重組酶的活性.以上結果錶明本研究研製的pSP-A-Cre轉基因小鼠可用于在Ⅱ型肺上皮細胞中進行條件基因打靶和細胞譜繫分析.
Ⅱ형폐상피세포합성화분비폐표면활성물질(PS),여폐손상후적수복유관,흔다폐상관질병적발생반수유Ⅱ형폐상피세포공능불전급PS계통결함.Ⅱ형폐상피세포재폐적발육、궤체면역급질병적발생발전과정중적구체공능상불명학,대조공Ⅱ형폐상피세포공능적유전궤제야지지심소.위료이용Cre-loxP계통연구조절Ⅱ형폐상피세포공능적유전궤제,연제료표면활성단백A(SP-A)계동자지도Cre중조매기인재전기인소서Ⅱ형폐상피세포중표체적전기인소서.장정합유Cre중조매기인적수건자소서여Smad4조건기인타파소서급ROSA26보고소서교배,이용기인조PCR화LacZ염색검측Cre중조매표체적조직분포급기체내개도loxP위점간중조적활성.다조직기인조PCR현시Cre중조매재전기인소서폐、뇌화소화도조직중표체.LacZ염색현시부재Ⅱ형폐상피세포중검측도Cre중조매적활성.이상결과표명본연구연제적pSP-A-Cre전기인소서가용우재Ⅱ형폐상피세포중진행조건기인타파화세포보계분석.
