中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2001年
4期
463-467
,共5页
罗绪刚%李素芬%邝霞%刘彬%李建凡%余顺祥%卜友泉%鲁成%李英文
囉緒剛%李素芬%鄺霞%劉彬%李建凡%餘順祥%蔔友泉%魯成%李英文
라서강%리소분%광하%류빈%리건범%여순상%복우천%로성%리영문
鸡%MnSOD%cDNA%RACE%序列分析%同源性分析
鷄%MnSOD%cDNA%RACE%序列分析%同源性分析
계%MnSOD%cDNA%RACE%서렬분석%동원성분석
为弄清鸡含锰超氧化物歧化酶(manganese-containing superoxide dismutase,MnSOD)的cDNA序列,以开展动物锰营养学的深入研究,根据已知鸡MnSOD的N端氨基酸序列设计简并引物,应用3＇RACE(rapid amptification of cDNA ends)技术,扩增克隆了鸡心肌MnSOD 990 bp的3＇cDNA片段.再根据3＇RACE片段测序结果设计引物进行5＇RACE,结果获取了一个与3＇RACE片段相互重叠的鸡心肌MnSOD 521 bp的5＇RACE片段,并对其进行了克隆测序.最后根据3＇RACE片段和5＇RACE片段序列信息进行拼接,从而获取鸡MnSOD cDNA的全序列信息.研究结果表明:鸡MnSOD cDNA全长为1 108个核苷酸,其中5＇非翻译区25个核苷酸,编码区675个核苷酸,3＇非翻译区408个核苷酸,编码一个长224个氨基酸残基的蛋白质前体.其中信号肽长26个氨基酸残基,成熟肽长198个氨基酸残基,分子量为22 kD.与人、大鼠、线虫、果蝇等真核生物MnSOD氨基酸序列的同源性分别为82.4%、84.7%、62.4%、59.3%.
為弄清鷄含錳超氧化物歧化酶(manganese-containing superoxide dismutase,MnSOD)的cDNA序列,以開展動物錳營養學的深入研究,根據已知鷄MnSOD的N耑氨基痠序列設計簡併引物,應用3＇RACE(rapid amptification of cDNA ends)技術,擴增剋隆瞭鷄心肌MnSOD 990 bp的3＇cDNA片段.再根據3＇RACE片段測序結果設計引物進行5＇RACE,結果穫取瞭一箇與3＇RACE片段相互重疊的鷄心肌MnSOD 521 bp的5＇RACE片段,併對其進行瞭剋隆測序.最後根據3＇RACE片段和5＇RACE片段序列信息進行拼接,從而穫取鷄MnSOD cDNA的全序列信息.研究結果錶明:鷄MnSOD cDNA全長為1 108箇覈苷痠,其中5＇非翻譯區25箇覈苷痠,編碼區675箇覈苷痠,3＇非翻譯區408箇覈苷痠,編碼一箇長224箇氨基痠殘基的蛋白質前體.其中信號肽長26箇氨基痠殘基,成熟肽長198箇氨基痠殘基,分子量為22 kD.與人、大鼠、線蟲、果蠅等真覈生物MnSOD氨基痠序列的同源性分彆為82.4%、84.7%、62.4%、59.3%.
위롱청계함맹초양화물기화매(manganese-containing superoxide dismutase,MnSOD)적cDNA서렬,이개전동물맹영양학적심입연구,근거이지계MnSOD적N단안기산서렬설계간병인물,응용3＇RACE(rapid amptification of cDNA ends)기술,확증극륭료계심기MnSOD 990 bp적3＇cDNA편단.재근거3＇RACE편단측서결과설계인물진행5＇RACE,결과획취료일개여3＇RACE편단상호중첩적계심기MnSOD 521 bp적5＇RACE편단,병대기진행료극륭측서.최후근거3＇RACE편단화5＇RACE편단서렬신식진행병접,종이획취계MnSOD cDNA적전서렬신식.연구결과표명:계MnSOD cDNA전장위1 108개핵감산,기중5＇비번역구25개핵감산,편마구675개핵감산,3＇비번역구408개핵감산,편마일개장224개안기산잔기적단백질전체.기중신호태장26개안기산잔기,성숙태장198개안기산잔기,분자량위22 kD.여인、대서、선충、과승등진핵생물MnSOD안기산서렬적동원성분별위82.4%、84.7%、62.4%、59.3%.
