生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2000年
2期
142-146
,共5页
蓝海燕%张丽华%刘桂珍%王岚兰%陈正华%田颖川%王长海
藍海燕%張麗華%劉桂珍%王嵐蘭%陳正華%田穎川%王長海
람해연%장려화%류계진%왕람란%진정화%전영천%왕장해
几丁质酶基因,β-1,3-葡聚糖酶基因,转基因油菜,抗菌核病,农杆菌介导
幾丁質酶基因,β-1,3-葡聚糖酶基因,轉基因油菜,抗菌覈病,農桿菌介導
궤정질매기인,β-1,3-포취당매기인,전기인유채,항균핵병,농간균개도
利用农杆菌转化法,将组成型表达β-1,3-葡聚糖酶及几丁质酶基因的双价植物表达载体pBLGC转化优质甘蓝型油菜品种H165,并得到了抗卡那霉素(Kanamycin,Kan)的再生植株.我们对所得到的抗Kan的再生苗进行了初步分子生物学检测,结果表明,在K15(Kan 15mg/L)培养基上的绿苗中有30%为PCR阳性植株,而在K25(Kan 10mg/L)培养基上的绿苗有53%的阳性率.对部分PCR阳性的转基因植株进行了点杂交分析,结果均表现出较强的杂交信号,这初步说明外源基因已整合到油菜基因组中.转基因植株的活体接种油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorium)试验表明,部分转基因植株比对照显示较强抗病性.
利用農桿菌轉化法,將組成型錶達β-1,3-葡聚糖酶及幾丁質酶基因的雙價植物錶達載體pBLGC轉化優質甘藍型油菜品種H165,併得到瞭抗卡那黴素(Kanamycin,Kan)的再生植株.我們對所得到的抗Kan的再生苗進行瞭初步分子生物學檢測,結果錶明,在K15(Kan 15mg/L)培養基上的綠苗中有30%為PCR暘性植株,而在K25(Kan 10mg/L)培養基上的綠苗有53%的暘性率.對部分PCR暘性的轉基因植株進行瞭點雜交分析,結果均錶現齣較彊的雜交信號,這初步說明外源基因已整閤到油菜基因組中.轉基因植株的活體接種油菜菌覈病菌(Sclerotinia sclerotiorium)試驗錶明,部分轉基因植株比對照顯示較彊抗病性.
이용농간균전화법,장조성형표체β-1,3-포취당매급궤정질매기인적쌍개식물표체재체pBLGC전화우질감람형유채품충H165,병득도료항잡나매소(Kanamycin,Kan)적재생식주.아문대소득도적항Kan적재생묘진행료초보분자생물학검측,결과표명,재K15(Kan 15mg/L)배양기상적록묘중유30%위PCR양성식주,이재K25(Kan 10mg/L)배양기상적록묘유53%적양성솔.대부분PCR양성적전기인식주진행료점잡교분석,결과균표현출교강적잡교신호,저초보설명외원기인이정합도유채기인조중.전기인식주적활체접충유채균핵병균(Sclerotinia sclerotiorium)시험표명,부분전기인식주비대조현시교강항병성.
