高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2000年
3期
1-4
,共4页
李卓玉%范俊虎%王菊香%袁静明
李卓玉%範俊虎%王菊香%袁靜明
리탁옥%범준호%왕국향%원정명
pTXB-hNT3%人神经营养因子-3%内蛋白子%温度诱导%融合表达%生物活性
pTXB-hNT3%人神經營養因子-3%內蛋白子%溫度誘導%融閤錶達%生物活性
pTXB-hNT3%인신경영양인자-3%내단백자%온도유도%융합표체%생물활성
将重组质粒pTXB-NT3(6.9kb)与载体pJLA503(4.9kb)分别用Nde 1/BamH 1双酶切,然后将前者的人神经营养因子3-内蛋白子-几丁质结合区(hNT3-intein-CBD)DNA 片段插入后者载体中,构建成一个含内蛋白子的温度诱导型表达载体pLZY01.经转化后,工程菌E.coli BL21/pLZY01在LB培养基中培养,表达产物约为42kD的hNT3-intein-CBD融合蛋白,经DTT不完全化学拆除后,可得约15kD的hNT3,27kD的intein-CBD及42kD的 融合蛋白,产物经鸡胚背根神经节测定其生物活性,融合蛋白在80ng,hNT3在25ng时能较好地促进神经纤维的伸长.
將重組質粒pTXB-NT3(6.9kb)與載體pJLA503(4.9kb)分彆用Nde 1/BamH 1雙酶切,然後將前者的人神經營養因子3-內蛋白子-幾丁質結閤區(hNT3-intein-CBD)DNA 片段插入後者載體中,構建成一箇含內蛋白子的溫度誘導型錶達載體pLZY01.經轉化後,工程菌E.coli BL21/pLZY01在LB培養基中培養,錶達產物約為42kD的hNT3-intein-CBD融閤蛋白,經DTT不完全化學拆除後,可得約15kD的hNT3,27kD的intein-CBD及42kD的 融閤蛋白,產物經鷄胚揹根神經節測定其生物活性,融閤蛋白在80ng,hNT3在25ng時能較好地促進神經纖維的伸長.
장중조질립pTXB-NT3(6.9kb)여재체pJLA503(4.9kb)분별용Nde 1/BamH 1쌍매절,연후장전자적인신경영양인자3-내단백자-궤정질결합구(hNT3-intein-CBD)DNA 편단삽입후자재체중,구건성일개함내단백자적온도유도형표체재체pLZY01.경전화후,공정균E.coli BL21/pLZY01재LB배양기중배양,표체산물약위42kD적hNT3-intein-CBD융합단백,경DTT불완전화학탁제후,가득약15kD적hNT3,27kD적intein-CBD급42kD적 융합단백,산물경계배배근신경절측정기생물활성,융합단백재80ng,hNT3재25ng시능교호지촉진신경섬유적신장.
