CAJ | 학술논문

目的:检测本实验室构建的表达人细胞色素P450 3A4同功酶转基因细胞系CHL-3A4的硝苯吡啶氧化酶活性.方法:利用多药耐药细胞K562r的阿霉素(ADR)耐药性可被硝苯吡啶逆转,而硝苯吡啶又可特异地被CYP3A4代谢,观察硝苯吡啶在CHL-3A4 S9混合物(S9mix)中孵育前后的生物学活性变化来判断CHL-3A4细胞的CYP3A4硝苯吡啶氧化酶活性.结果:K562r细胞在含有硝苯吡啶(NIF)(12.5μg·L-1)的培养基中培养时,对阿霉素的IC50值从不含NIF时的(6.47±0.60)mg·L-1降至(0.89±0.15)mg·L-1(P＜0.01).K562r细胞在含有分别经CHL-3A4、CHL细胞的S9组分和灭活的CHL-3A4细胞的S9组分预处理的NIF(12.5μg·L-1)的培养基中培养时,阿霉素对其的IC50值分别为(6.10±0.50)mg·L-1、(0.32±0.09)mg·L-1和(0.32±0.04)mg·L-1.前者和后两者相比P＜0.01.结论:实验室构建的表达人细胞色素P450 3A4同功酶转基因细胞系CHL-3A4具有硝苯吡啶氧化酶活性,从而进一步确证其表达产物为人CYP3A4同功酶.并为今后检测CYP同功酶活性提供了一种新的途径.
목적:검측본실험실구건적표체인세포색소P450 3A4동공매전기인세포계CHL-3A4적초분필정양화매활성.방법:이용다약내약세포K562r적아매소(ADR)내약성가피초분필정역전,이초분필정우가특이지피CYP3A4대사,관찰초분필정재CHL-3A4 S9혼합물(S9mix)중부육전후적생물학활성변화래판단CHL-3A4세포적CYP3A4초분필정양화매활성.결과:K562r세포재함유초분필정(NIF)(12.5μg·L-1)적배양기중배양시,대아매소적IC50치종불함NIF시적(6.47±0.60)mg·L-1강지(0.89±0.15)mg·L-1(P＜0.01).K562r세포재함유분별경CHL-3A4、CHL세포적S9조분화멸활적CHL-3A4세포적S9조분예처리적NIF(12.5μg·L-1)적배양기중배양시,아매소대기적IC50치분별위(6.10±0.50)mg·L-1、(0.32±0.09)mg·L-1화(0.32±0.04)mg·L-1.전자화후량자상비P＜0.01.결론:실험실구건적표체인세포색소P450 3A4동공매전기인세포계CHL-3A4구유초분필정양화매활성,종이진일보학증기표체산물위인CYP3A4동공매.병위금후검측CYP동공매활성제공료일충신적도경.