中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2002年
10期
1228-1232
,共5页
曹开源%崔蕴霞%徐霖%郭琳洁%张胜%宁波
曹開源%崔蘊霞%徐霖%郭琳潔%張勝%寧波
조개원%최온하%서림%곽림길%장성%저파
成纤维细胞生长因子,碱性%脐静脉%内皮细胞
成纖維細胞生長因子,堿性%臍靜脈%內皮細胞
성섬유세포생장인자,감성%제정맥%내피세포
目的:研究牛bFGF-pcDNA3在体外培养人脐静脉内皮细胞中的表达与活性,及对该细胞生物学特性的影响.方法:脂质体法将bFGF-pcDNA3真核表达载体转染体外培养的人脐静脉内皮细胞,经G418筛选阳性克隆.通过免疫细胞化学法检测bFGF的表达部位及Ⅷ因子相关抗原的表达.应用化学发光Western blotting法检测bFGF在转染细胞与未转染细胞中的表达.绘制细胞的生长曲线并计算倍增时间,采用MTT法对bFGF的生物活性进行估计.结果:bFGF-pcDNA3转染人脐静脉内皮细胞后,细胞呈梭形者增多.免疫细胞化学证实转染前后细胞均为血管内皮来源细胞,转染与未转染细胞均在胞浆内表达bFGF.Western blotting证实细胞转染前后均表达17kD bFGF,但转染后表达量增高,细胞生长曲线上移,倍增时间缩短.MTT法证实转染细胞产生的bFGF其生物学活性约相当于持续添加外源性bFGF 571.4 ng/L.结论:转染bFGF cDNA的人脐静脉内皮细胞能在体外增殖,并具有表达与分泌活性bFGF的功能.bFGF-pcDNA3可引起内源性bFGF表达增高,对血管内皮细胞产生相应的生物学活性.
目的:研究牛bFGF-pcDNA3在體外培養人臍靜脈內皮細胞中的錶達與活性,及對該細胞生物學特性的影響.方法:脂質體法將bFGF-pcDNA3真覈錶達載體轉染體外培養的人臍靜脈內皮細胞,經G418篩選暘性剋隆.通過免疫細胞化學法檢測bFGF的錶達部位及Ⅷ因子相關抗原的錶達.應用化學髮光Western blotting法檢測bFGF在轉染細胞與未轉染細胞中的錶達.繪製細胞的生長麯線併計算倍增時間,採用MTT法對bFGF的生物活性進行估計.結果:bFGF-pcDNA3轉染人臍靜脈內皮細胞後,細胞呈梭形者增多.免疫細胞化學證實轉染前後細胞均為血管內皮來源細胞,轉染與未轉染細胞均在胞漿內錶達bFGF.Western blotting證實細胞轉染前後均錶達17kD bFGF,但轉染後錶達量增高,細胞生長麯線上移,倍增時間縮短.MTT法證實轉染細胞產生的bFGF其生物學活性約相噹于持續添加外源性bFGF 571.4 ng/L.結論:轉染bFGF cDNA的人臍靜脈內皮細胞能在體外增殖,併具有錶達與分泌活性bFGF的功能.bFGF-pcDNA3可引起內源性bFGF錶達增高,對血管內皮細胞產生相應的生物學活性.
목적:연구우bFGF-pcDNA3재체외배양인제정맥내피세포중적표체여활성,급대해세포생물학특성적영향.방법:지질체법장bFGF-pcDNA3진핵표체재체전염체외배양적인제정맥내피세포,경G418사선양성극륭.통과면역세포화학법검측bFGF적표체부위급Ⅷ인자상관항원적표체.응용화학발광Western blotting법검측bFGF재전염세포여미전염세포중적표체.회제세포적생장곡선병계산배증시간,채용MTT법대bFGF적생물활성진행고계.결과:bFGF-pcDNA3전염인제정맥내피세포후,세포정사형자증다.면역세포화학증실전염전후세포균위혈관내피래원세포,전염여미전염세포균재포장내표체bFGF.Western blotting증실세포전염전후균표체17kD bFGF,단전염후표체량증고,세포생장곡선상이,배증시간축단.MTT법증실전염세포산생적bFGF기생물학활성약상당우지속첨가외원성bFGF 571.4 ng/L.결론:전염bFGF cDNA적인제정맥내피세포능재체외증식,병구유표체여분비활성bFGF적공능.bFGF-pcDNA3가인기내원성bFGF표체증고,대혈관내피세포산생상응적생물학활성.
