北京大学学报(医学版)
北京大學學報(醫學版)
북경대학학보(의학판)
JOURNAL OF PEAKING UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2002年
4期
316-320
,共5页
李现亭%夏东岚%莫晓宁%宋泉声%张颖妹%马大龙
李現亭%夏東嵐%莫曉寧%宋泉聲%張穎妹%馬大龍
리현정%하동람%막효저%송천성%장영매%마대룡
胱天蛋白酶-3%半胱氨酸蛋白酶类/代谢%酶激活
胱天蛋白酶-3%半胱氨痠蛋白酶類/代謝%酶激活
광천단백매-3%반광안산단백매류/대사%매격활
目的:建立一个在短时间内获取大量活化胱天蛋白酶-3的方法.方法:将胱天蛋白酶-3酶原的基因从真核表达载体中克隆到原核表达载体pMTY4-His中,在大肠杆菌中以包涵体的形式表达MS2-胱天蛋白酶原-3融合蛋白;将包涵体变性,经酸化和浓缩进行体外活化;对所得蛋白用Western blot和活性试验进行鉴定.结果:构建成pMTY4-His-胱天蛋白酶-3原核表达载体,在大肠杆菌中获得了较高水平表达的胱天蛋白酶原-3酶原-MS2融合蛋白.体外活化后每升诱导菌可获得约10 mg蛋白,用抗胱天蛋白酶-3单克隆抗体证实所得蛋白为胱天蛋白酶原-3,活性试验证实得到高活性的蛋白.结论: 成功地建立了大量获取高活性的胱天蛋白酶-3的方法,为深入研究胱天蛋白酶-3的功能和性质提供物质基础.
目的:建立一箇在短時間內穫取大量活化胱天蛋白酶-3的方法.方法:將胱天蛋白酶-3酶原的基因從真覈錶達載體中剋隆到原覈錶達載體pMTY4-His中,在大腸桿菌中以包涵體的形式錶達MS2-胱天蛋白酶原-3融閤蛋白;將包涵體變性,經痠化和濃縮進行體外活化;對所得蛋白用Western blot和活性試驗進行鑒定.結果:構建成pMTY4-His-胱天蛋白酶-3原覈錶達載體,在大腸桿菌中穫得瞭較高水平錶達的胱天蛋白酶原-3酶原-MS2融閤蛋白.體外活化後每升誘導菌可穫得約10 mg蛋白,用抗胱天蛋白酶-3單剋隆抗體證實所得蛋白為胱天蛋白酶原-3,活性試驗證實得到高活性的蛋白.結論: 成功地建立瞭大量穫取高活性的胱天蛋白酶-3的方法,為深入研究胱天蛋白酶-3的功能和性質提供物質基礎.
목적:건립일개재단시간내획취대량활화광천단백매-3적방법.방법:장광천단백매-3매원적기인종진핵표체재체중극륭도원핵표체재체pMTY4-His중,재대장간균중이포함체적형식표체MS2-광천단백매원-3융합단백;장포함체변성,경산화화농축진행체외활화;대소득단백용Western blot화활성시험진행감정.결과:구건성pMTY4-His-광천단백매-3원핵표체재체,재대장간균중획득료교고수평표체적광천단백매원-3매원-MS2융합단백.체외활화후매승유도균가획득약10 mg단백,용항광천단백매-3단극륭항체증실소득단백위광천단백매원-3,활성시험증실득도고활성적단백.결론: 성공지건립료대량획취고활성적광천단백매-3적방법,위심입연구광천단백매-3적공능화성질제공물질기출.
