中国病理生理杂志
中國病理生理雜誌
중국병리생리잡지
CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY
2001年
11期
1043-1047
,共5页
赵新永%殷莲华%孔宪寿%杨轶群
趙新永%慇蓮華%孔憲壽%楊軼群
조신영%은련화%공헌수%양질군
逆转录病毒科%癌基因%寡核苷核类,反义
逆轉錄病毒科%癌基因%寡覈苷覈類,反義
역전록병독과%암기인%과핵감핵류,반의
目的:研究c-myc基因在L6565小鼠白血病发生中的作用以及抑制其表达所起的治疗作用. 方法:用逆转录病毒载体pGNC构建一个含有小鼠反义c-myc基因的逆转录病毒表达系统pGNCas.用磷酸钙沉淀法将pGNCas导入包装细胞PA317,筛选获得病毒生产细胞.用pGNCas病毒感染L6565白血病克隆细胞, 筛选后,获得抗G418阳性克隆细胞L6565as.PCR方法检测反义c-myc序列是否稳定整合入L6565as细胞中.最后从细胞生长、形态、周期、软琼脂集落形成能力以及c-myc基因表达方面观察其恶性和表型的改变. 结果:L6565as细胞形态变圆,大小较一致.生长曲线显示:L6565as细胞生长被抑制;流式细胞仪检测细胞周期: L6565as阻滞于G0/G1期,S期细胞减少;软琼脂集落形成试验发现L6565as细胞形成克隆数明显减少.免疫组化检测:L6565as细胞c-myc蛋白表达呈弱阳性,而对照组细胞呈强阳性.结论:c-myc基因在L6565小鼠白血病的发生中起着重要的作用;抑制c-myc的表达,可部分逆转L6565白血病的恶性表型和恶性行为.
目的:研究c-myc基因在L6565小鼠白血病髮生中的作用以及抑製其錶達所起的治療作用. 方法:用逆轉錄病毒載體pGNC構建一箇含有小鼠反義c-myc基因的逆轉錄病毒錶達繫統pGNCas.用燐痠鈣沉澱法將pGNCas導入包裝細胞PA317,篩選穫得病毒生產細胞.用pGNCas病毒感染L6565白血病剋隆細胞, 篩選後,穫得抗G418暘性剋隆細胞L6565as.PCR方法檢測反義c-myc序列是否穩定整閤入L6565as細胞中.最後從細胞生長、形態、週期、軟瓊脂集落形成能力以及c-myc基因錶達方麵觀察其噁性和錶型的改變. 結果:L6565as細胞形態變圓,大小較一緻.生長麯線顯示:L6565as細胞生長被抑製;流式細胞儀檢測細胞週期: L6565as阻滯于G0/G1期,S期細胞減少;軟瓊脂集落形成試驗髮現L6565as細胞形成剋隆數明顯減少.免疫組化檢測:L6565as細胞c-myc蛋白錶達呈弱暘性,而對照組細胞呈彊暘性.結論:c-myc基因在L6565小鼠白血病的髮生中起著重要的作用;抑製c-myc的錶達,可部分逆轉L6565白血病的噁性錶型和噁性行為.
목적:연구c-myc기인재L6565소서백혈병발생중적작용이급억제기표체소기적치료작용. 방법:용역전록병독재체pGNC구건일개함유소서반의c-myc기인적역전록병독표체계통pGNCas.용린산개침정법장pGNCas도입포장세포PA317,사선획득병독생산세포.용pGNCas병독감염L6565백혈병극륭세포, 사선후,획득항G418양성극륭세포L6565as.PCR방법검측반의c-myc서렬시부은정정합입L6565as세포중.최후종세포생장、형태、주기、연경지집락형성능력이급c-myc기인표체방면관찰기악성화표형적개변. 결과:L6565as세포형태변원,대소교일치.생장곡선현시:L6565as세포생장피억제;류식세포의검측세포주기: L6565as조체우G0/G1기,S기세포감소;연경지집락형성시험발현L6565as세포형성극륭수명현감소.면역조화검측:L6565as세포c-myc단백표체정약양성,이대조조세포정강양성.결론:c-myc기인재L6565소서백혈병적발생중기착중요적작용;억제c-myc적표체,가부분역전L6565백혈병적악성표형화악성행위.
