CAJ | 학술논문

根据GenBank已发表的多个BVDV-1序列的比较分析结果设计引物,应用RT-PCR及套式PCR克隆得到包含Changchun184(CC-184)株E2基因的片段F2/R2,克隆、测序分析结果表明该片段大小为1391bp,软件分析结果表明CC-184株E2基因长度为1122bp(GenBank accession number:AF526380).通过基因操作构建得到表达完整E2蛋白和去除E2蛋白C-端疏水区的重组质粒pET28a-BE2和pET28a-BE2m,转化大肠杆菌并诱导目的蛋白表达,SDS-PAGE检测结果表明重组菌能表达目的蛋白,其表达量分别占菌体总蛋白的6.25%和35.7%.Western blot分析结果正实表达蛋白为CC-184株E2蛋白.
근거GenBank이발표적다개BVDV-1서렬적비교분석결과설계인물,응용RT-PCR급투식PCR극륭득도포함Changchun184(CC-184)주E2기인적편단F2/R2,극륭、측서분석결과표명해편단대소위1391bp,연건분석결과표명CC-184주E2기인장도위1122bp(GenBank accession number:AF526380).통과기인조작구건득도표체완정E2단백화거제E2단백C-단소수구적중조질립pET28a-BE2화pET28a-BE2m,전화대장간균병유도목적단백표체,SDS-PAGE검측결과표명중조균능표체목적단백,기표체량분별점균체총단백적6.25%화35.7%.Western blot분석결과정실표체단백위CC-184주E2단백.