CAJ | 학술논문

目的:建立稳定表达EGFR-GFP融合蛋白的细胞系.方法:CaCl2法将pEGFR-EGFP质粒转化DH5α,酶切鉴定后提取质粒经电穿孔转染CHO-K1细胞;以EGFP作为荧光报告分子,克隆化培养以获取单克隆阳性细胞;流式细胞术、荧光显微镜术、Western Blot检测转染细胞EGFR-GFP融合蛋白的表达;比较稳定转染细胞及未转染细胞的生长曲线;反复冻存、复苏、传代鉴定细胞表达EGFR-GFP融合蛋白的稳定性.结果:获得1株稳定表达EGFR-GFP融合蛋白的细胞系,命名为CHO-EGFR-GFP1,融合蛋白主要表达于细胞膜.稳定转染细胞和未转染细胞生长特性无显著差异.结论:成功获得膜表面稳定表达EGFR-GFP融合蛋白的细胞系,为研制以EGFR为靶点的抗肿瘤药物以及研究EGFR与其配体间相互作用奠定了基础.
목적:건립은정표체EGFR-GFP융합단백적세포계.방법:CaCl2법장pEGFR-EGFP질립전화DH5α,매절감정후제취질립경전천공전염CHO-K1세포;이EGFP작위형광보고분자,극륭화배양이획취단극륭양성세포;류식세포술、형광현미경술、Western Blot검측전염세포EGFR-GFP융합단백적표체;비교은정전염세포급미전염세포적생장곡선;반복동존、복소、전대감정세포표체EGFR-GFP융합단백적은정성.결과:획득1주은정표체EGFR-GFP융합단백적세포계,명명위CHO-EGFR-GFP1,융합단백주요표체우세포막.은정전염세포화미전염세포생장특성무현저차이.결론:성공획득막표면은정표체EGFR-GFP융합단백적세포계,위연제이EGFR위파점적항종류약물이급연구EGFR여기배체간상호작용전정료기출.