植物遗传资源学报
植物遺傳資源學報
식물유전자원학보
JOURNAL OF PLANT GENETLC RESOURCES
2006年
2期
165-169
,共5页
宋燕%陈丽静%李君明%张智%李天来%徐和金%周永健
宋燕%陳麗靜%李君明%張智%李天來%徐和金%週永健
송연%진려정%리군명%장지%리천래%서화금%주영건
番茄%多重PCR反应%叶霉病%番茄烟草花叶病毒病
番茄%多重PCR反應%葉黴病%番茄煙草花葉病毒病
번가%다중PCR반응%협매병%번가연초화협병독병
利用同一PCR反应体系,对分别与番茄抗叶霉病的Cf-9基因和抗番茄烟草花叶病毒病的Tm-1基因紧密连锁的PCR标记进行了同时扩增筛选,扩增的特异性片段与单引物扩增片段吻合.其中与Cf-9基因紧密连锁的CAPs标记在抗感试材均可扩增出560bp的特异片段,且都存在TaqⅠ酶切位点,抗病基因型酶切后分别产生了450bp、330bp和290bp的不同特异性片段,而感病基因型试材酶切后产生450bp和290bp的特异性片段;与Tm-1基因紧密连锁的SCAR标记为显性标记,只有抗病试材产生750bp的特异片段,不能被TaqⅠ酶切.经反复验证,结果稳定准确,可用于在同一PCR反应体系中对两个抗病基因进行同时筛选鉴定.该体系的建立不仅省时、省工、节省费用,而且可用于苗期辅助选育,加快番茄抗病育种进程.
利用同一PCR反應體繫,對分彆與番茄抗葉黴病的Cf-9基因和抗番茄煙草花葉病毒病的Tm-1基因緊密連鎖的PCR標記進行瞭同時擴增篩選,擴增的特異性片段與單引物擴增片段吻閤.其中與Cf-9基因緊密連鎖的CAPs標記在抗感試材均可擴增齣560bp的特異片段,且都存在TaqⅠ酶切位點,抗病基因型酶切後分彆產生瞭450bp、330bp和290bp的不同特異性片段,而感病基因型試材酶切後產生450bp和290bp的特異性片段;與Tm-1基因緊密連鎖的SCAR標記為顯性標記,隻有抗病試材產生750bp的特異片段,不能被TaqⅠ酶切.經反複驗證,結果穩定準確,可用于在同一PCR反應體繫中對兩箇抗病基因進行同時篩選鑒定.該體繫的建立不僅省時、省工、節省費用,而且可用于苗期輔助選育,加快番茄抗病育種進程.
이용동일PCR반응체계,대분별여번가항협매병적Cf-9기인화항번가연초화협병독병적Tm-1기인긴밀련쇄적PCR표기진행료동시확증사선,확증적특이성편단여단인물확증편단문합.기중여Cf-9기인긴밀련쇄적CAPs표기재항감시재균가확증출560bp적특이편단,차도존재TaqⅠ매절위점,항병기인형매절후분별산생료450bp、330bp화290bp적불동특이성편단,이감병기인형시재매절후산생450bp화290bp적특이성편단;여Tm-1기인긴밀련쇄적SCAR표기위현성표기,지유항병시재산생750bp적특이편단,불능피TaqⅠ매절.경반복험증,결과은정준학,가용우재동일PCR반응체계중대량개항병기인진행동시사선감정.해체계적건립불부성시、성공、절성비용,이차가용우묘기보조선육,가쾌번가항병육충진정.
