麦类作物学报
麥類作物學報
맥류작물학보
JOURNAL OF TRITICEAE CROPS
2006年
3期
1-7
,共7页
萧凤回%段承俐%张红生%翟虎渠%薛刚平
蕭鳳迴%段承俐%張紅生%翟虎渠%薛剛平
소봉회%단승리%장홍생%적호거%설강평
大麦%脱水%启动子%序列%表达载体
大麥%脫水%啟動子%序列%錶達載體
대맥%탈수%계동자%서렬%표체재체
为进一步研究脱水可诱导启动子的结构和功能,并为开展禾谷类植物转基因研究选择启动子提供依据,用大麦品种撒哈拉幼苗提取的总DNA为模板,利用设计合成的引物对进行PCR定向扩增,获得了HVA1s、Dhn4s和Dhn8s启动子片段.通过分离、纯化、酶切和连接,把启动子片段分别插入到带有GFP和GUS报告基因的表达载体质粒中.经测序确认,目标启动子片段与原报道的同源启动子序列一致性达95.3%以上.HVA1s、Dhn4s和Dhn8s启动子在构建的瞬间表达载体pHVA1sGFPG、pDhn4sGFPG、Dhn8sGFPG和pHVA1sGUSR、pDhn4sGUSR、pDhn8sGUSR中,都具有启动表达报告基因的能力,通过基因枪转化大麦幼苗可有效启动gfp和gus基因瞬间表达.
為進一步研究脫水可誘導啟動子的結構和功能,併為開展禾穀類植物轉基因研究選擇啟動子提供依據,用大麥品種撒哈拉幼苗提取的總DNA為模闆,利用設計閤成的引物對進行PCR定嚮擴增,穫得瞭HVA1s、Dhn4s和Dhn8s啟動子片段.通過分離、純化、酶切和連接,把啟動子片段分彆插入到帶有GFP和GUS報告基因的錶達載體質粒中.經測序確認,目標啟動子片段與原報道的同源啟動子序列一緻性達95.3%以上.HVA1s、Dhn4s和Dhn8s啟動子在構建的瞬間錶達載體pHVA1sGFPG、pDhn4sGFPG、Dhn8sGFPG和pHVA1sGUSR、pDhn4sGUSR、pDhn8sGUSR中,都具有啟動錶達報告基因的能力,通過基因鎗轉化大麥幼苗可有效啟動gfp和gus基因瞬間錶達.
위진일보연구탈수가유도계동자적결구화공능,병위개전화곡류식물전기인연구선택계동자제공의거,용대맥품충살합랍유묘제취적총DNA위모판,이용설계합성적인물대진행PCR정향확증,획득료HVA1s、Dhn4s화Dhn8s계동자편단.통과분리、순화、매절화련접,파계동자편단분별삽입도대유GFP화GUS보고기인적표체재체질립중.경측서학인,목표계동자편단여원보도적동원계동자서렬일치성체95.3%이상.HVA1s、Dhn4s화Dhn8s계동자재구건적순간표체재체pHVA1sGFPG、pDhn4sGFPG、Dhn8sGFPG화pHVA1sGUSR、pDhn4sGUSR、pDhn8sGUSR중,도구유계동표체보고기인적능력,통과기인창전화대맥유묘가유효계동gfp화gus기인순간표체.
