CAJ | 학술논문

目的:观察染料木黄酮对成骨细胞活性的影响及其相关机制.方法:实验于2001-05/2003-05在卫生学环境医学研究所实验室完成.①成骨细胞培养:无菌条件下分离出生3 d的乳鼠颅盖骨,剪碎,加入胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶,用含体积分数为0.1的胎牛血清的F-12培养基重悬,调整细胞浓度后接种于25 mL细胞培养瓶,Ⅱ代细胞用于实验.②实验方法:实验分为染料木黄酮组、雌激素组和对照组(吐温20),染料木黄酮剂量分别为10-5,10-6、10-7mol/L,雌激素剂量分别为10-9,10-10mol/L,培养48,72 h后,应用MTT和3H-TdR掺入实验观察不同剂量的染料木黄酮和雌激素对成骨细胞活性影响,免疫组化的方法测定白细胞介素6表达.结果:①A570nm值:培养48 h,染料木黄酮10-5,10-6,10-7 mol/L组分别比对照组增加105%,136%和143%;10-9,10-10mol/L雌激素组分别比对照组增加84%和100%;培养72 h,染料木黄酮3个剂量组分别比对照组增加93%,113%和146%,各剂量组与对照组相比均有显著性差异(P＜0.05).②3H-TdR掺入量:10-5,10-6,10-7mol/L染料木黄酮组分别比对照组增加0.47,11.29,6.45倍;10-9和10-10mol/L雌激素组增加15.4倍和16.5倍(P＜0.05).③白细胞介素6表达:各组成骨细胞周围均有较强的呈棕色的阳性颗粒,但染料木黄酮组组与对照组相比无明显差别.结论:①10-5～10-7 mol/L染料木黄酮和雌激素一样可促进成骨细胞增殖和DNA合成.②染料木黄酮不是通过促进白细胞介素6表达来促进成骨细胞增殖与分化.
목적:관찰염료목황동대성골세포활성적영향급기상관궤제.방법:실험우2001-05/2003-05재위생학배경의학연구소실험실완성.①성골세포배양:무균조건하분리출생3 d적유서로개골,전쇄,가입이단백매화Ⅱ형효원매,용함체적분수위0.1적태우혈청적F-12배양기중현,조정세포농도후접충우25 mL세포배양병,Ⅱ대세포용우실험.②실험방법:실험분위염료목황동조、자격소조화대조조(토온20),염료목황동제량분별위10-5,10-6、10-7mol/L,자격소제량분별위10-9,10-10mol/L,배양48,72 h후,응용MTT화3H-TdR참입실험관찰불동제량적염료목황동화자격소대성골세포활성영향,면역조화적방법측정백세포개소6표체.결과:①A570nm치:배양48 h,염료목황동10-5,10-6,10-7 mol/L조분별비대조조증가105%,136%화143%;10-9,10-10mol/L자격소조분별비대조조증가84%화100%;배양72 h,염료목황동3개제량조분별비대조조증가93%,113%화146%,각제량조여대조조상비균유현저성차이(P＜0.05).②3H-TdR참입량:10-5,10-6,10-7mol/L염료목황동조분별비대조조증가0.47,11.29,6.45배;10-9화10-10mol/L자격소조증가15.4배화16.5배(P＜0.05).③백세포개소6표체:각조성골세포주위균유교강적정종색적양성과립,단염료목황동조조여대조조상비무명현차별.결론:①10-5～10-7 mol/L염료목황동화자격소일양가촉진성골세포증식화DNA합성.②염료목황동불시통과촉진백세포개소6표체래촉진성골세포증식여분화.