微生物学通报
微生物學通報
미생물학통보
MICROBIOLOGY
2007年
6期
1174-1178
,共5页
李光飞%邓代永%许枚%岑英华%孙国萍
李光飛%鄧代永%許枚%岑英華%孫國萍
리광비%산대영%허매%잠영화%손국평
荧光蛋白%脱色希瓦氏菌S12%Plasposon
熒光蛋白%脫色希瓦氏菌S12%Plasposon
형광단백%탈색희와씨균S12%Plasposon
采用分子生物学手段将具有转座功能的自杀性质粒pTnMod-okm与荧光蛋白基因eyfp构建重组质粒pTE-okm.pTE-okm通过结合转移进入脱色希瓦氏菌S12中,质粒上的转座子元件转座到S12的染色体上,而质粒本身的窄宿主复制位点使其在S12中不能得到有效的复制而"自杀".荧光显微镜下筛选表达荧光蛋白的脱色希瓦氏菌克隆,通过对其提取质粒确定pTE-okm已经在脱色希瓦氏菌中自杀.筛选得到生长速度未发生延迟、脱色能力不受影响的荧光标记菌株S12-40.标记的脱色希瓦氏菌在无抗生素压力的情况下培养,传代20次(8h/次)后在荧光显微镜下依然查看到荧光蛋白的表达.该菌株的构建为研究其生态学行为奠定了基础.
採用分子生物學手段將具有轉座功能的自殺性質粒pTnMod-okm與熒光蛋白基因eyfp構建重組質粒pTE-okm.pTE-okm通過結閤轉移進入脫色希瓦氏菌S12中,質粒上的轉座子元件轉座到S12的染色體上,而質粒本身的窄宿主複製位點使其在S12中不能得到有效的複製而"自殺".熒光顯微鏡下篩選錶達熒光蛋白的脫色希瓦氏菌剋隆,通過對其提取質粒確定pTE-okm已經在脫色希瓦氏菌中自殺.篩選得到生長速度未髮生延遲、脫色能力不受影響的熒光標記菌株S12-40.標記的脫色希瓦氏菌在無抗生素壓力的情況下培養,傳代20次(8h/次)後在熒光顯微鏡下依然查看到熒光蛋白的錶達.該菌株的構建為研究其生態學行為奠定瞭基礎.
채용분자생물학수단장구유전좌공능적자살성질립pTnMod-okm여형광단백기인eyfp구건중조질립pTE-okm.pTE-okm통과결합전이진입탈색희와씨균S12중,질립상적전좌자원건전좌도S12적염색체상,이질립본신적착숙주복제위점사기재S12중불능득도유효적복제이"자살".형광현미경하사선표체형광단백적탈색희와씨균극륭,통과대기제취질립학정pTE-okm이경재탈색희와씨균중자살.사선득도생장속도미발생연지、탈색능력불수영향적형광표기균주S12-40.표기적탈색희와씨균재무항생소압력적정황하배양,전대20차(8h/차)후재형광현미경하의연사간도형광단백적표체.해균주적구건위연구기생태학행위전정료기출.
