CAJ | 학술논문

背景与目的:大肠侧向发育型肿瘤(colorectal laterally spreading tumor, CLST)生长方式为沿大肠粘膜浅表侧向扩散而少向肠壁深层侵袭,该特点与普通大肠癌的易深层侵袭高转移的特性迥异,因此CLST可作为大肠癌侵袭转移研究的对照病变模型.本研究应用蛋白质组学方法分析和鉴定CLST细胞株LST-R1和结肠肿瘤SW480细胞株及LoVo细胞株差异表达蛋白.方法:以2-DE分离三种细胞株总蛋白质,银染显色,进行差异蛋白质分析.采用MOLDI-TOF质谱对40个差异蛋白质斑点进行肽质谱指纹图(peptides mass fingerprinting,PMF)分析,最后在蛋白质数据库中搜索匹配的蛋白质.结果:使用pH4～7 IPG胶条测得2-DE图谱蛋白质斑点数分别为1285±51、1184±47和1124±54;蛋白质上样量为150μg时分别获得989、935和893个蛋白质斑点.综合分析LST-R1、SW480和LoVo细胞株2-DE图谱,多数蛋白质斑点的分布和表达量相似,这表明CLST也表达一般大肠肿瘤所具有的蛋白质谱.LST-R1细胞和SW480细胞在pH4～7 IPG胶条2-DE图谱间存在(96±7)个蛋白质差异点,其中(50±6)个点仅在LST-R1细胞株中表达或表达明显增强,(47±5)个点仅在SW480细胞中表达或表达明显增强;而在LST-R1细胞和LoVo细胞的2-DE图谱间存在(108±10)蛋白质差异点,其中(56±8)个点仅在LST-R1细胞株中表达或表达明显增强,(52±11)个点仅在LoVo细胞中表达或表达明显增强;三种细胞之间共鉴定出19个差异表达蛋白质.结论:筛选出19个CLST细胞株LST-R1相关蛋白质,这些蛋白可能在CLST病变浅表扩散形成和大肠癌粘附侵袭过程中发挥一定的作用.
배경여목적:대장측향발육형종류(colorectal laterally spreading tumor, CLST)생장방식위연대장점막천표측향확산이소향장벽심층침습,해특점여보통대장암적역심층침습고전이적특성형이,인차CLST가작위대장암침습전이연구적대조병변모형.본연구응용단백질조학방법분석화감정CLST세포주LST-R1화결장종류SW480세포주급LoVo세포주차이표체단백.방법:이2-DE분리삼충세포주총단백질,은염현색,진행차이단백질분석.채용MOLDI-TOF질보대40개차이단백질반점진행태질보지문도(peptides mass fingerprinting,PMF)분석,최후재단백질수거고중수색필배적단백질.결과:사용pH4～7 IPG효조측득2-DE도보단백질반점수분별위1285±51、1184±47화1124±54;단백질상양량위150μg시분별획득989、935화893개단백질반점.종합분석LST-R1、SW480화LoVo세포주2-DE도보,다수단백질반점적분포화표체량상사,저표명CLST야표체일반대장종류소구유적단백질보.LST-R1세포화SW480세포재pH4～7 IPG효조2-DE도보간존재(96±7)개단백질차이점,기중(50±6)개점부재LST-R1세포주중표체혹표체명현증강,(47±5)개점부재SW480세포중표체혹표체명현증강;이재LST-R1세포화LoVo세포적2-DE도보간존재(108±10)단백질차이점,기중(56±8)개점부재LST-R1세포주중표체혹표체명현증강,(52±11)개점부재LoVo세포중표체혹표체명현증강;삼충세포지간공감정출19개차이표체단백질.결론:사선출19개CLST세포주LST-R1상관단백질,저사단백가능재CLST병변천표확산형성화대장암점부침습과정중발휘일정적작용.