河北农业大学学报
河北農業大學學報
하북농업대학학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL UNIVERSITY OF HEBEI
2009年
2期
102-105
,共4页
靳慧君%李楠%郭常春%韩冬梅%王微%仲飞
靳慧君%李楠%郭常春%韓鼕梅%王微%仲飛
근혜군%리남%곽상춘%한동매%왕미%중비
犬-γ干扰素%HEK293T细胞%表达
犬-γ榦擾素%HEK293T細胞%錶達
견-γ간우소%HEK293T세포%표체
为了建立一套犬IFN-γ(cIFN-γ)在HEK293T细胞中表达的方法,用伴刀豆球蛋白A(ConA)刺激犬脾细胞,通过RT-PCR方法从脾细胞中扩增犬IFN-γ基因,并将其克隆到pcDNA3.1A载体中,构建的真核表达载体pcDNA3.1A-cIFN-γ经磷酸钙介导转染HEK293T细胞进行表达.结果表明:克隆的犬IFN-γ cDNA 基因与GenBank上发表的序列一致,同源性100%.表达产物经Western-blot方法检测,证明克隆的犬IFN-γ基因能够在HEK293T细胞中进行表达,并且表达产物能够分泌到细胞外.
為瞭建立一套犬IFN-γ(cIFN-γ)在HEK293T細胞中錶達的方法,用伴刀豆毬蛋白A(ConA)刺激犬脾細胞,通過RT-PCR方法從脾細胞中擴增犬IFN-γ基因,併將其剋隆到pcDNA3.1A載體中,構建的真覈錶達載體pcDNA3.1A-cIFN-γ經燐痠鈣介導轉染HEK293T細胞進行錶達.結果錶明:剋隆的犬IFN-γ cDNA 基因與GenBank上髮錶的序列一緻,同源性100%.錶達產物經Western-blot方法檢測,證明剋隆的犬IFN-γ基因能夠在HEK293T細胞中進行錶達,併且錶達產物能夠分泌到細胞外.
위료건립일투견IFN-γ(cIFN-γ)재HEK293T세포중표체적방법,용반도두구단백A(ConA)자격견비세포,통과RT-PCR방법종비세포중확증견IFN-γ기인,병장기극륭도pcDNA3.1A재체중,구건적진핵표체재체pcDNA3.1A-cIFN-γ경린산개개도전염HEK293T세포진행표체.결과표명:극륭적견IFN-γ cDNA 기인여GenBank상발표적서렬일치,동원성100%.표체산물경Western-blot방법검측,증명극륭적견IFN-γ기인능구재HEK293T세포중진행표체,병차표체산물능구분비도세포외.
