中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2009年
8期
600-604
,共5页
崔京春%张宝君%钱爱东%王全凯%童光志
崔京春%張寶君%錢愛東%王全凱%童光誌
최경춘%장보군%전애동%왕전개%동광지
金黄色葡萄球菌%肠毒素C%基因克隆%融合表达
金黃色葡萄毬菌%腸毒素C%基因剋隆%融閤錶達
금황색포도구균%장독소C%기인극륭%융합표체
为表达和纯化金黄色葡萄球菌(金葡菌)超抗原毒素,本研究从金葡菌中克隆葡萄球菌肠毒素C2(sec2)基因,构建了表达葡萄球菌肠毒素C与谷胱甘肽硫转移酶(GST-SEC)融合蛋白的重组质粒(pGEMSEC),通过大肠杆菌表达、亲和纯化、酶切、再亲和纯化,建立了便于大量制备高纯度的重组SEC(rSEC)的简便方法.此外,通过酶联免疫试验及双向琼脂扩散试验检测了rSEC免疫反应性,并通过测定rSEC刺激鼠脾细胞产炎性因子来检测了rSEC的超抗原活性.结果表明,rSEC与野生型SEC具有相同的免疫反应性和超抗原活性,为在今后对该超抗原进行进一步应用性开发和构建定点减毒诱变奠定了工作基础.
為錶達和純化金黃色葡萄毬菌(金葡菌)超抗原毒素,本研究從金葡菌中剋隆葡萄毬菌腸毒素C2(sec2)基因,構建瞭錶達葡萄毬菌腸毒素C與穀胱甘肽硫轉移酶(GST-SEC)融閤蛋白的重組質粒(pGEMSEC),通過大腸桿菌錶達、親和純化、酶切、再親和純化,建立瞭便于大量製備高純度的重組SEC(rSEC)的簡便方法.此外,通過酶聯免疫試驗及雙嚮瓊脂擴散試驗檢測瞭rSEC免疫反應性,併通過測定rSEC刺激鼠脾細胞產炎性因子來檢測瞭rSEC的超抗原活性.結果錶明,rSEC與野生型SEC具有相同的免疫反應性和超抗原活性,為在今後對該超抗原進行進一步應用性開髮和構建定點減毒誘變奠定瞭工作基礎.
위표체화순화금황색포도구균(금포균)초항원독소,본연구종금포균중극륭포도구균장독소C2(sec2)기인,구건료표체포도구균장독소C여곡광감태류전이매(GST-SEC)융합단백적중조질립(pGEMSEC),통과대장간균표체、친화순화、매절、재친화순화,건립료편우대량제비고순도적중조SEC(rSEC)적간편방법.차외,통과매련면역시험급쌍향경지확산시험검측료rSEC면역반응성,병통과측정rSEC자격서비세포산염성인자래검측료rSEC적초항원활성.결과표명,rSEC여야생형SEC구유상동적면역반응성화초항원활성,위재금후대해초항원진행진일보응용성개발화구건정점감독유변전정료공작기출.
