河南农业大学学报
河南農業大學學報
하남농업대학학보
ACTA AGRICULTURAE UNIVERSITATIS HENANENSIS
2010年
4期
448-452
,共5页
载体大小%木聚糖酶含量%影响
載體大小%木聚糖酶含量%影響
재체대소%목취당매함량%영향
将黑曲霉Aspergillus niger木聚糖酶基因与表达载体pET21a(5 443 bp)和pET20b(3 716 bp)重组,而后转化E.coli BL21(DE3) 细胞,发现大载体细胞和小载体细胞中质粒DNA浓度为(4.6±0.01),(5.5±0.01)g·L-1,木聚糖酶含量为(57.2±10.6),(140.2±22.1) mg·L-1,木聚糖酶酶活性为(6.6±0.2),(69.6±11.2) U·mL-1.相对于大载体细胞,小载体细胞质粒浓度增加19.5%,木聚糖酶含量增加1.45倍,木聚糖酶活性增加9.5倍,说明载体大小对外源蛋白表达的影响效应呈递增趋势.由此可见,小型载体在表达外源蛋白时更利于减少宿主细胞的负担,利于质粒扩增并提高基因拷贝数,最后提高木聚糖酶含量及活性.
將黑麯黴Aspergillus niger木聚糖酶基因與錶達載體pET21a(5 443 bp)和pET20b(3 716 bp)重組,而後轉化E.coli BL21(DE3) 細胞,髮現大載體細胞和小載體細胞中質粒DNA濃度為(4.6±0.01),(5.5±0.01)g·L-1,木聚糖酶含量為(57.2±10.6),(140.2±22.1) mg·L-1,木聚糖酶酶活性為(6.6±0.2),(69.6±11.2) U·mL-1.相對于大載體細胞,小載體細胞質粒濃度增加19.5%,木聚糖酶含量增加1.45倍,木聚糖酶活性增加9.5倍,說明載體大小對外源蛋白錶達的影響效應呈遞增趨勢.由此可見,小型載體在錶達外源蛋白時更利于減少宿主細胞的負擔,利于質粒擴增併提高基因拷貝數,最後提高木聚糖酶含量及活性.
장흑곡매Aspergillus niger목취당매기인여표체재체pET21a(5 443 bp)화pET20b(3 716 bp)중조,이후전화E.coli BL21(DE3) 세포,발현대재체세포화소재체세포중질립DNA농도위(4.6±0.01),(5.5±0.01)g·L-1,목취당매함량위(57.2±10.6),(140.2±22.1) mg·L-1,목취당매매활성위(6.6±0.2),(69.6±11.2) U·mL-1.상대우대재체세포,소재체세포질립농도증가19.5%,목취당매함량증가1.45배,목취당매활성증가9.5배,설명재체대소대외원단백표체적영향효응정체증추세.유차가견,소형재체재표체외원단백시경리우감소숙주세포적부담,리우질립확증병제고기인고패수,최후제고목취당매함량급활성.
