中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2012年
8期
607-610
,共4页
赵大维%朱彦青%陈伟业%胡倩倩%殷倩倩%黄克和%步志高
趙大維%硃彥青%陳偉業%鬍倩倩%慇倩倩%黃剋和%步誌高
조대유%주언청%진위업%호천천%은천천%황극화%보지고
蓝舌病病毒%VP5基因%原核表达%间接ELISA
藍舌病病毒%VP5基因%原覈錶達%間接ELISA
람설병병독%VP5기인%원핵표체%간접ELISA
为表达蓝舌病病毒(BTV)VP5蛋白并检测其生物学活性,本实验采用RT-PCR方法扩增血清12型BTV的VP5基因,构建重组质粒pMAL-VP5.将重组质粒转化TB1感受态细胞,以0.4mmol/L的IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果显示,融合了大肠杆菌麦芽糖结合蛋白(MBP)标签的VP5重组蛋白以可溶形式表达,分子质量约为112.2ku.利用MBP标签对重组蛋白进行纯化,并以其作为包被抗原,间接ELISA检测山羊血清样品,结果5份羊血清P/N值均大于1,其中有1只羊检测结果P/N值为2.396,鉴定为阳性血清,表明重组蛋白可以与VP5抗体反应,可以作为检测BTV VP5抗体的抗原,为今后进一步开展BT诊断研究奠定了基础.
為錶達藍舌病病毒(BTV)VP5蛋白併檢測其生物學活性,本實驗採用RT-PCR方法擴增血清12型BTV的VP5基因,構建重組質粒pMAL-VP5.將重組質粒轉化TB1感受態細胞,以0.4mmol/L的IPTG進行誘導錶達,SDS-PAGE電泳結果顯示,融閤瞭大腸桿菌麥芽糖結閤蛋白(MBP)標籤的VP5重組蛋白以可溶形式錶達,分子質量約為112.2ku.利用MBP標籤對重組蛋白進行純化,併以其作為包被抗原,間接ELISA檢測山羊血清樣品,結果5份羊血清P/N值均大于1,其中有1隻羊檢測結果P/N值為2.396,鑒定為暘性血清,錶明重組蛋白可以與VP5抗體反應,可以作為檢測BTV VP5抗體的抗原,為今後進一步開展BT診斷研究奠定瞭基礎.
위표체람설병병독(BTV)VP5단백병검측기생물학활성,본실험채용RT-PCR방법확증혈청12형BTV적VP5기인,구건중조질립pMAL-VP5.장중조질립전화TB1감수태세포,이0.4mmol/L적IPTG진행유도표체,SDS-PAGE전영결과현시,융합료대장간균맥아당결합단백(MBP)표첨적VP5중조단백이가용형식표체,분자질량약위112.2ku.이용MBP표첨대중조단백진행순화,병이기작위포피항원,간접ELISA검측산양혈청양품,결과5빈양혈청P/N치균대우1,기중유1지양검측결과P/N치위2.396,감정위양성혈청,표명중조단백가이여VP5항체반응,가이작위검측BTV VP5항체적항원,위금후진일보개전BT진단연구전정료기출.
