中国血吸虫病防治杂志
中國血吸蟲病防治雜誌
중국혈흡충병방치잡지
CHINESE JOURNAL OF SCHISTOSOMIASIS CONTROL
2012年
4期
440-444
,共5页
邱春辉%刘升发%洪炀%傅志强%张旻%魏梅梅%艾德宙%林矫矫
邱春輝%劉升髮%洪煬%傅誌彊%張旻%魏梅梅%艾德宙%林矯矯
구춘휘%류승발%홍양%부지강%장민%위매매%애덕주%림교교
日本血吸虫%视黄酸X受体2%cDNA末端快速扩增技术%核受体
日本血吸蟲%視黃痠X受體2%cDNA末耑快速擴增技術%覈受體
일본혈흡충%시황산X수체2%cDNA말단쾌속확증기술%핵수체
目的 克隆编码日本血吸虫视黄酸X受体2(SjRXR2)蛋白的全长cDNA,并对其进行初步研究.方法 利用cDNA末端快速扩增技术(RACE)获得SjRXR2蛋白全长编码cDNA.利用生物信息学技术,对基因结构进行初步分析.利用实时荧光定量(Real-time) PCR技术对该基因在日本血吸虫不同时期虫体中的转录情况进行分析.应用在线抗体表位预测软件获得SjRXR2配体结合区抗原性较强的一个多肽序列,合成该多肽片段,并免疫小鼠制备抗血清.利用Western blot技术分析该蛋白在日本血吸虫中的表达.结果 采用RACE技术成功获得了SjRXR2蛋白全长编码cDNA,总长度为5 960bp,其完整开放阅读框为4 308 bp,编码1 435个氨基酸,预测分子量为159 kDa.生物信息学分析表明该基因编码的蛋白质序列具有核受体家族2的典型结构域特征,且与曼氏血吸虫RXR2有较高的相似性.Real-time PCR分析表明,该基因在21、42d龄日本血吸虫虫体内有较高的转录水平.Western blot分析表明,小鼠SjRXR2多肽免疫血清可特异性识别日本血吸虫虫体150 kDa蛋白.结论 成功获得了编码SjRXR2蛋白的全长cDNA,并制备了针对该蛋白的特异性多克隆抗体,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础.
目的 剋隆編碼日本血吸蟲視黃痠X受體2(SjRXR2)蛋白的全長cDNA,併對其進行初步研究.方法 利用cDNA末耑快速擴增技術(RACE)穫得SjRXR2蛋白全長編碼cDNA.利用生物信息學技術,對基因結構進行初步分析.利用實時熒光定量(Real-time) PCR技術對該基因在日本血吸蟲不同時期蟲體中的轉錄情況進行分析.應用在線抗體錶位預測軟件穫得SjRXR2配體結閤區抗原性較彊的一箇多肽序列,閤成該多肽片段,併免疫小鼠製備抗血清.利用Western blot技術分析該蛋白在日本血吸蟲中的錶達.結果 採用RACE技術成功穫得瞭SjRXR2蛋白全長編碼cDNA,總長度為5 960bp,其完整開放閱讀框為4 308 bp,編碼1 435箇氨基痠,預測分子量為159 kDa.生物信息學分析錶明該基因編碼的蛋白質序列具有覈受體傢族2的典型結構域特徵,且與曼氏血吸蟲RXR2有較高的相似性.Real-time PCR分析錶明,該基因在21、42d齡日本血吸蟲蟲體內有較高的轉錄水平.Western blot分析錶明,小鼠SjRXR2多肽免疫血清可特異性識彆日本血吸蟲蟲體150 kDa蛋白.結論 成功穫得瞭編碼SjRXR2蛋白的全長cDNA,併製備瞭針對該蛋白的特異性多剋隆抗體,為進一步研究該蛋白的功能奠定瞭基礎.
목적 극륭편마일본혈흡충시황산X수체2(SjRXR2)단백적전장cDNA,병대기진행초보연구.방법 이용cDNA말단쾌속확증기술(RACE)획득SjRXR2단백전장편마cDNA.이용생물신식학기술,대기인결구진행초보분석.이용실시형광정량(Real-time) PCR기술대해기인재일본혈흡충불동시기충체중적전록정황진행분석.응용재선항체표위예측연건획득SjRXR2배체결합구항원성교강적일개다태서렬,합성해다태편단,병면역소서제비항혈청.이용Western blot기술분석해단백재일본혈흡충중적표체.결과 채용RACE기술성공획득료SjRXR2단백전장편마cDNA,총장도위5 960bp,기완정개방열독광위4 308 bp,편마1 435개안기산,예측분자량위159 kDa.생물신식학분석표명해기인편마적단백질서렬구유핵수체가족2적전형결구역특정,차여만씨혈흡충RXR2유교고적상사성.Real-time PCR분석표명,해기인재21、42d령일본혈흡충충체내유교고적전록수평.Western blot분석표명,소서SjRXR2다태면역혈청가특이성식별일본혈흡충충체150 kDa단백.결론 성공획득료편마SjRXR2단백적전장cDNA,병제비료침대해단백적특이성다극륭항체,위진일보연구해단백적공능전정료기출.
