中华实验和临床病毒学杂志
中華實驗和臨床病毒學雜誌
중화실험화림상병독학잡지
CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL AND CLINICAL VIROLOGY
2005年
3期
227-231
,共5页
彭夫望%高寒春%谢志平%张辉%李启明%段招军%侯云德
彭伕望%高寒春%謝誌平%張輝%李啟明%段招軍%侯雲德
팽부망%고한춘%사지평%장휘%리계명%단초군%후운덕
干扰素Ⅰ型%包涵体%蛋白质复性%生物活性%基因芯片
榦擾素Ⅰ型%包涵體%蛋白質複性%生物活性%基因芯片
간우소Ⅰ형%포함체%단백질복성%생물활성%기인심편
目的表达纯化一种新型重组人干扰素Epsilon(rhIFN-ε155ser),并对它的生物学特性进行初步研究.方法人工合成rhIFN-ε155ser的全基因序列,并按照大肠埃希菌密码子嗜性作适当改造,然后构建到原核表达载体pBV220,在大肠埃希菌DH5α中表达.将表达的包涵体蛋白纯化复性后,对最终产物的抗病毒活性、细胞生长抑制活性和NK细胞刺激活性进行鉴定.同时,利用芯片技术,从基因的水平对rhIFN-ε155ser的生物机制进行初步的了解.结果rhIFN-ε155ser以包涵体的形式表达,经纯化蛋白纯度可达95%.复性后rhIFN-ε155ser在WISH抗VSV系统中的抗病毒活性可达6×105IU/mg.在100～1000 pg/ml下rhIFN-ε155ser具有剂量依赖性的抗增殖活性,而NK细胞刺激活性无剂量依赖性.基因芯片扫描发现,22 278个位点中,有283个基因显著上调,另外1894个显著下降.结论成功地表达了rhIFN-ε155ser,发现此IFN具有一定的抗病毒、抗增殖和NK细胞刺激活性.芯片技术可进一步拓展对IFN的功能研究.
目的錶達純化一種新型重組人榦擾素Epsilon(rhIFN-ε155ser),併對它的生物學特性進行初步研究.方法人工閤成rhIFN-ε155ser的全基因序列,併按照大腸埃希菌密碼子嗜性作適噹改造,然後構建到原覈錶達載體pBV220,在大腸埃希菌DH5α中錶達.將錶達的包涵體蛋白純化複性後,對最終產物的抗病毒活性、細胞生長抑製活性和NK細胞刺激活性進行鑒定.同時,利用芯片技術,從基因的水平對rhIFN-ε155ser的生物機製進行初步的瞭解.結果rhIFN-ε155ser以包涵體的形式錶達,經純化蛋白純度可達95%.複性後rhIFN-ε155ser在WISH抗VSV繫統中的抗病毒活性可達6×105IU/mg.在100～1000 pg/ml下rhIFN-ε155ser具有劑量依賴性的抗增殖活性,而NK細胞刺激活性無劑量依賴性.基因芯片掃描髮現,22 278箇位點中,有283箇基因顯著上調,另外1894箇顯著下降.結論成功地錶達瞭rhIFN-ε155ser,髮現此IFN具有一定的抗病毒、抗增殖和NK細胞刺激活性.芯片技術可進一步拓展對IFN的功能研究.
목적표체순화일충신형중조인간우소Epsilon(rhIFN-ε155ser),병대타적생물학특성진행초보연구.방법인공합성rhIFN-ε155ser적전기인서렬,병안조대장애희균밀마자기성작괄당개조,연후구건도원핵표체재체pBV220,재대장애희균DH5α중표체.장표체적포함체단백순화복성후,대최종산물적항병독활성、세포생장억제활성화NK세포자격활성진행감정.동시,이용심편기술,종기인적수평대rhIFN-ε155ser적생물궤제진행초보적료해.결과rhIFN-ε155ser이포함체적형식표체,경순화단백순도가체95%.복성후rhIFN-ε155ser재WISH항VSV계통중적항병독활성가체6×105IU/mg.재100～1000 pg/ml하rhIFN-ε155ser구유제량의뢰성적항증식활성,이NK세포자격활성무제량의뢰성.기인심편소묘발현,22 278개위점중,유283개기인현저상조,령외1894개현저하강.결론성공지표체료rhIFN-ε155ser,발현차IFN구유일정적항병독、항증식화NK세포자격활성.심편기술가진일보탁전대IFN적공능연구.
