中国中西医结合急救杂志
中國中西醫結閤急救雜誌
중국중서의결합급구잡지
INTEGRATED TRADITIONAL CHINESE AND WESTERN MEDICINE IN PRACTICE OF CRITICAL CARE MEDICINE
2005年
3期
135-139
,共5页
聂广%江远%李泽松%江福生
聶廣%江遠%李澤鬆%江福生
섭엄%강원%리택송%강복생
基因芯片%莪术%肝纤维化%肝星状细胞
基因芯片%莪術%肝纖維化%肝星狀細胞
기인심편%아술%간섬유화%간성상세포
目的:研究莪术4种有效成分(莪术油、莪术醇、β-榄香烯、姜黄素)对肝星状细胞-T6(HSC-T6)基因表达的影响.方法:从基因库中查询50种肝纤维化相关基因的mRNA序列,用寡核苷酸探针设计软件设计探针,在PE8909DNA合成仪上合成寡核苷酸,用OGR-04点样仪及醛基化玻片制备成基因芯片.以秋水仙碱、莪术油、莪术醇、β-榄香烯、姜黄素不同浓度含药培养液培养HSC-T6细胞.根据细胞毒性实验,确定细胞存活率在50%以上的药物浓度作为实验所用浓度,每组设空白对照组,分别按1、6、12和24 h 4个时间段收集细胞.按操作步骤提取细胞总RNA,经逆转录荧光标记、杂交和洗涤,用Genepix 4000B扫描仪扫描芯片和Ima Gene 4.2软件进行数据分析并归一化处理,使用看家基因和阳性对照对Cy3和Cy5扫描结果进行校正.结果:秋水仙碱6.25 μg/ml作用HSC-T6细胞12 h,可使基质金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)表达下调220%;莪术油78.125 μg/ml作用HSC-T6细胞24 h,可使基因TIMP2、白细胞介素-6表达分别下调230%和220%;莪术醇1.562 5 μg/ml作用HSC-T6细胞12 h,可使转化生长因子-β1、P450a基因表达下调230%和210%.结论:本研究从分子水平揭示了莪术有效成分莪术油、莪术醇的抗肝纤维化机制.
目的:研究莪術4種有效成分(莪術油、莪術醇、β-欖香烯、薑黃素)對肝星狀細胞-T6(HSC-T6)基因錶達的影響.方法:從基因庫中查詢50種肝纖維化相關基因的mRNA序列,用寡覈苷痠探針設計軟件設計探針,在PE8909DNA閤成儀上閤成寡覈苷痠,用OGR-04點樣儀及醛基化玻片製備成基因芯片.以鞦水仙堿、莪術油、莪術醇、β-欖香烯、薑黃素不同濃度含藥培養液培養HSC-T6細胞.根據細胞毒性實驗,確定細胞存活率在50%以上的藥物濃度作為實驗所用濃度,每組設空白對照組,分彆按1、6、12和24 h 4箇時間段收集細胞.按操作步驟提取細胞總RNA,經逆轉錄熒光標記、雜交和洗滌,用Genepix 4000B掃描儀掃描芯片和Ima Gene 4.2軟件進行數據分析併歸一化處理,使用看傢基因和暘性對照對Cy3和Cy5掃描結果進行校正.結果:鞦水仙堿6.25 μg/ml作用HSC-T6細胞12 h,可使基質金屬蛋白酶組織抑製劑1(TIMP1)錶達下調220%;莪術油78.125 μg/ml作用HSC-T6細胞24 h,可使基因TIMP2、白細胞介素-6錶達分彆下調230%和220%;莪術醇1.562 5 μg/ml作用HSC-T6細胞12 h,可使轉化生長因子-β1、P450a基因錶達下調230%和210%.結論:本研究從分子水平揭示瞭莪術有效成分莪術油、莪術醇的抗肝纖維化機製.
목적:연구아술4충유효성분(아술유、아술순、β-람향희、강황소)대간성상세포-T6(HSC-T6)기인표체적영향.방법:종기인고중사순50충간섬유화상관기인적mRNA서렬,용과핵감산탐침설계연건설계탐침,재PE8909DNA합성의상합성과핵감산,용OGR-04점양의급철기화파편제비성기인심편.이추수선감、아술유、아술순、β-람향희、강황소불동농도함약배양액배양HSC-T6세포.근거세포독성실험,학정세포존활솔재50%이상적약물농도작위실험소용농도,매조설공백대조조,분별안1、6、12화24 h 4개시간단수집세포.안조작보취제취세포총RNA,경역전록형광표기、잡교화세조,용Genepix 4000B소묘의소묘심편화Ima Gene 4.2연건진행수거분석병귀일화처리,사용간가기인화양성대조대Cy3화Cy5소묘결과진행교정.결과:추수선감6.25 μg/ml작용HSC-T6세포12 h,가사기질금속단백매조직억제제1(TIMP1)표체하조220%;아술유78.125 μg/ml작용HSC-T6세포24 h,가사기인TIMP2、백세포개소-6표체분별하조230%화220%;아술순1.562 5 μg/ml작용HSC-T6세포12 h,가사전화생장인자-β1、P450a기인표체하조230%화210%.결론:본연구종분자수평게시료아술유효성분아술유、아술순적항간섬유화궤제.
