海洋与湖沼
海洋與湖沼
해양여호소
OCEANOLOGIA ET LIMNOLOGIA SINICA
2005年
4期
326-334
,共9页
高春萍%蔡中华%宋林生%吴龙涛%池振明
高春萍%蔡中華%宋林生%吳龍濤%池振明
고춘평%채중화%송림생%오룡도%지진명
黑鲷%肿瘤坏死因子α(TNF α)%克隆%特征分析
黑鯛%腫瘤壞死因子α(TNF α)%剋隆%特徵分析
흑조%종류배사인자α(TNF α)%극륭%특정분석
采用同源克隆的方法,从黑鲷中获得肿瘤坏死因子(TNF α)全长cDNA序列.该序列含1288个核苷酸,可编码253个氨基酸的TNF前体蛋白.它是一种跨膜蛋白,无糖基化位点和信号肽结构.黑鲷TNF α与其它鱼类的TNF α的相似性很高,占据进化上独立的分支;与哺乳类TNF α和TNF β源于共同的祖先.基因结构分析显示,该基因含有TNF家族profile和TNF家族的标签序列;在参与TNF α基因二硫键形成的两个半胱氨酸和TNF α三聚体形成的位点高度保守;空间结构模拟显示,它与哺乳类TNF α的空间结构相似,都是由两个β折叠片组成,每个折叠片包含5个反向平行的β链.表达研究结果表明,黑鲷TNF α在检测的各个组织中均为组成型表达,表现为在刺激与非刺激鱼体中,都可以检测到黑鲷TNF α的表达,但是其表达水平在不同组织中有很大差异.黑鲷TNF α在头肾、脾脏和鳃的表达量较高,而在心脏、肝脏、血液、肾脏和大脑中表达量较低.
採用同源剋隆的方法,從黑鯛中穫得腫瘤壞死因子(TNF α)全長cDNA序列.該序列含1288箇覈苷痠,可編碼253箇氨基痠的TNF前體蛋白.它是一種跨膜蛋白,無糖基化位點和信號肽結構.黑鯛TNF α與其它魚類的TNF α的相似性很高,佔據進化上獨立的分支;與哺乳類TNF α和TNF β源于共同的祖先.基因結構分析顯示,該基因含有TNF傢族profile和TNF傢族的標籤序列;在參與TNF α基因二硫鍵形成的兩箇半胱氨痠和TNF α三聚體形成的位點高度保守;空間結構模擬顯示,它與哺乳類TNF α的空間結構相似,都是由兩箇β摺疊片組成,每箇摺疊片包含5箇反嚮平行的β鏈.錶達研究結果錶明,黑鯛TNF α在檢測的各箇組織中均為組成型錶達,錶現為在刺激與非刺激魚體中,都可以檢測到黑鯛TNF α的錶達,但是其錶達水平在不同組織中有很大差異.黑鯛TNF α在頭腎、脾髒和鰓的錶達量較高,而在心髒、肝髒、血液、腎髒和大腦中錶達量較低.
채용동원극륭적방법,종흑조중획득종류배사인자(TNF α)전장cDNA서렬.해서렬함1288개핵감산,가편마253개안기산적TNF전체단백.타시일충과막단백,무당기화위점화신호태결구.흑조TNF α여기타어류적TNF α적상사성흔고,점거진화상독립적분지;여포유류TNF α화TNF β원우공동적조선.기인결구분석현시,해기인함유TNF가족profile화TNF가족적표첨서렬;재삼여TNF α기인이류건형성적량개반광안산화TNF α삼취체형성적위점고도보수;공간결구모의현시,타여포유류TNF α적공간결구상사,도시유량개β절첩편조성,매개절첩편포함5개반향평행적β련.표체연구결과표명,흑조TNF α재검측적각개조직중균위조성형표체,표현위재자격여비자격어체중,도가이검측도흑조TNF α적표체,단시기표체수평재불동조직중유흔대차이.흑조TNF α재두신、비장화새적표체량교고,이재심장、간장、혈액、신장화대뇌중표체량교저.
