中山大学学报(医学科学版)
中山大學學報(醫學科學版)
중산대학학보(의학과학판)
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2006年
3期
318-321
,共4页
匡世军%张志光%何一青%廖明庭%苏凯%张娟
劻世軍%張誌光%何一青%廖明庭%囌凱%張娟
광세군%장지광%하일청%료명정%소개%장연
纤维软骨%细胞培养%组织工程%关节盘
纖維軟骨%細胞培養%組織工程%關節盤
섬유연골%세포배양%조직공정%관절반
[目的]探讨颞下颌关节盘纤维软骨细胞的分离及体外扩增的条件,观察关节盘纤维软骨细胞体外培养的生物学特性.[方法]在无菌条件下,切取2周龄新西兰白兔颞下颌关节盘,剪至1.0m3的碎块,0.5g/mL胰酶消化30 min、胶原酶消化4 h,200目筛网过滤,获得关节盘纤维软骨细胞.在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化及贴壁率,甲苯胺蓝染色、、胶原免疫组化染色鉴定,测定其生长曲线.透射电镜观察细胞超微结构.[结果]原代培养的关节盘纤维软骨细胞12 h可观察到贴壁细胞,48 h贴壁细胞逐渐增多,大部分细胞为短梭形,小部分为多角形,第4天可见多个细胞克隆形成,第8天时细胞彼此相连,铺满平底,细胞以梭形为主,部分多角形.传代后12 h贴壁率达90%,大部分为多角形,4~5 d即可张满瓶底.甲苯胺蓝染色可见异染颗粒,、胶原免疫组化染色胞浆内可见棕黄色颗粒.细胞内线粒体、内质网发达、高尔基体发达.[结论]体外分离培养的兔颞下颌关节盘纤维软骨细胞具有较强的增殖能力.
[目的]探討顳下頜關節盤纖維軟骨細胞的分離及體外擴增的條件,觀察關節盤纖維軟骨細胞體外培養的生物學特性.[方法]在無菌條件下,切取2週齡新西蘭白兔顳下頜關節盤,剪至1.0m3的碎塊,0.5g/mL胰酶消化30 min、膠原酶消化4 h,200目篩網過濾,穫得關節盤纖維軟骨細胞.在倒置顯微鏡下連續觀察細胞的形態變化及貼壁率,甲苯胺藍染色、、膠原免疫組化染色鑒定,測定其生長麯線.透射電鏡觀察細胞超微結構.[結果]原代培養的關節盤纖維軟骨細胞12 h可觀察到貼壁細胞,48 h貼壁細胞逐漸增多,大部分細胞為短梭形,小部分為多角形,第4天可見多箇細胞剋隆形成,第8天時細胞彼此相連,鋪滿平底,細胞以梭形為主,部分多角形.傳代後12 h貼壁率達90%,大部分為多角形,4~5 d即可張滿瓶底.甲苯胺藍染色可見異染顆粒,、膠原免疫組化染色胞漿內可見棕黃色顆粒.細胞內線粒體、內質網髮達、高爾基體髮達.[結論]體外分離培養的兔顳下頜關節盤纖維軟骨細胞具有較彊的增殖能力.
[목적]탐토섭하합관절반섬유연골세포적분리급체외확증적조건,관찰관절반섬유연골세포체외배양적생물학특성.[방법]재무균조건하,절취2주령신서란백토섭하합관절반,전지1.0m3적쇄괴,0.5g/mL이매소화30 min、효원매소화4 h,200목사망과려,획득관절반섬유연골세포.재도치현미경하련속관찰세포적형태변화급첩벽솔,갑분알람염색、、효원면역조화염색감정,측정기생장곡선.투사전경관찰세포초미결구.[결과]원대배양적관절반섬유연골세포12 h가관찰도첩벽세포,48 h첩벽세포축점증다,대부분세포위단사형,소부분위다각형,제4천가견다개세포극륭형성,제8천시세포피차상련,포만평저,세포이사형위주,부분다각형.전대후12 h첩벽솔체90%,대부분위다각형,4~5 d즉가장만병저.갑분알람염색가견이염과립,、효원면역조화염색포장내가견종황색과립.세포내선립체、내질망발체、고이기체발체.[결론]체외분리배양적토섭하합관절반섬유연골세포구유교강적증식능력.