中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2007年
10期
1818-1821,1825
,共5页
目的:分析复方接骨中药对体外培养的骨髓间充质干细胞增殖、分化的影响.方法:实验于2003-12/2005-02在解放军第二五二医院完成.①取体质量(250±10)g的雄性SD大鼠60只,随机分为实验组和对照组,每组30只.②复方接骨中药(厚朴10 g,大黄10 g,枳壳10 g,桃仁10 g,苏木10 g,当归10 g,红花5 g,骨碎补15 g,川断15 g,熟地15 g,自然铜10 g,龟板10 g,枸杞15 9,杜仲15 g)按体表面积折算为SD大鼠的等效剂量后,按中医传统方法煎制,灌喂量2.5 mL/(只·d).于晨8:00灌喂实验组大鼠.在同样的条件下用等量浓缩自来水灌喂对照组.两组均连续灌喂10 d.末次灌喂前一天20:00大鼠禁食禁水,末次灌喂后2 h,取股动脉血制备出含药血清及对照血清.③取3个月龄雄性SD大鼠1只,在无菌条件下取股骨、胫骨骨髓,实验组骨髓细胞采用体积分数为0.1含药血清+DMEM培养.对照组骨髓细胞采用体积分数为0.1非含药血清+DMEM培养,传代3次后用于实验.每日于倒置显微镜下观察细胞生长情况及形态变化,于培养第24,48,72,96,120小时用四唑盐法检测细胞的增殖情况(用吸光度表示),于培养1,2,3,4周末用碱性磷酸酶检测细胞分化情况. 结果:60只大鼠均进入结果分析.①两组细胞的生长曲线均呈"S"形,在72,96,120 h时实验组细胞均比对照组细胞增殖迅速(吸光度值分别为0.213±0.021,0.192±0.032;0.341±0.031,0.274±0.021;0.401±0.016,0.325±0.014,P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01).②两组细胞均是在第2周末时碱性磷酸酶活力达到高峰,第3周末开始下降.第2,3周末时实验组碱性磷酸酶活力显著大于对照组[(10.28±0.71),(7.41±0.53)nkat/L,P＜0.01;(8.81±0.76),(6.37±0.41)nkat/L,P＜0.05].③镜下观察实验组骨髓间充质干细胞大量诱导分化为成骨细胞,对照组成骨细胞数量、密度明显低于实验组.结论:复方接骨中药可以促进体外培养的骨髓间充质干细胞增殖及向成骨细胞方向分化.
目的:分析複方接骨中藥對體外培養的骨髓間充質榦細胞增殖、分化的影響.方法:實驗于2003-12/2005-02在解放軍第二五二醫院完成.①取體質量(250±10)g的雄性SD大鼠60隻,隨機分為實驗組和對照組,每組30隻.②複方接骨中藥(厚樸10 g,大黃10 g,枳殼10 g,桃仁10 g,囌木10 g,噹歸10 g,紅花5 g,骨碎補15 g,川斷15 g,熟地15 g,自然銅10 g,龜闆10 g,枸杞15 9,杜仲15 g)按體錶麵積摺算為SD大鼠的等效劑量後,按中醫傳統方法煎製,灌餵量2.5 mL/(隻·d).于晨8:00灌餵實驗組大鼠.在同樣的條件下用等量濃縮自來水灌餵對照組.兩組均連續灌餵10 d.末次灌餵前一天20:00大鼠禁食禁水,末次灌餵後2 h,取股動脈血製備齣含藥血清及對照血清.③取3箇月齡雄性SD大鼠1隻,在無菌條件下取股骨、脛骨骨髓,實驗組骨髓細胞採用體積分數為0.1含藥血清+DMEM培養.對照組骨髓細胞採用體積分數為0.1非含藥血清+DMEM培養,傳代3次後用于實驗.每日于倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況及形態變化,于培養第24,48,72,96,120小時用四唑鹽法檢測細胞的增殖情況(用吸光度錶示),于培養1,2,3,4週末用堿性燐痠酶檢測細胞分化情況. 結果:60隻大鼠均進入結果分析.①兩組細胞的生長麯線均呈"S"形,在72,96,120 h時實驗組細胞均比對照組細胞增殖迅速(吸光度值分彆為0.213±0.021,0.192±0.032;0.341±0.031,0.274±0.021;0.401±0.016,0.325±0.014,P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01).②兩組細胞均是在第2週末時堿性燐痠酶活力達到高峰,第3週末開始下降.第2,3週末時實驗組堿性燐痠酶活力顯著大于對照組[(10.28±0.71),(7.41±0.53)nkat/L,P＜0.01;(8.81±0.76),(6.37±0.41)nkat/L,P＜0.05].③鏡下觀察實驗組骨髓間充質榦細胞大量誘導分化為成骨細胞,對照組成骨細胞數量、密度明顯低于實驗組.結論:複方接骨中藥可以促進體外培養的骨髓間充質榦細胞增殖及嚮成骨細胞方嚮分化.
목적:분석복방접골중약대체외배양적골수간충질간세포증식、분화적영향.방법:실험우2003-12/2005-02재해방군제이오이의원완성.①취체질량(250±10)g적웅성SD대서60지,수궤분위실험조화대조조,매조30지.②복방접골중약(후박10 g,대황10 g,지각10 g,도인10 g,소목10 g,당귀10 g,홍화5 g,골쇄보15 g,천단15 g,숙지15 g,자연동10 g,구판10 g,구기15 9,두중15 g)안체표면적절산위SD대서적등효제량후,안중의전통방법전제,관위량2.5 mL/(지·d).우신8:00관위실험조대서.재동양적조건하용등량농축자래수관위대조조.량조균련속관위10 d.말차관위전일천20:00대서금식금수,말차관위후2 h,취고동맥혈제비출함약혈청급대조혈청.③취3개월령웅성SD대서1지,재무균조건하취고골、경골골수,실험조골수세포채용체적분수위0.1함약혈청+DMEM배양.대조조골수세포채용체적분수위0.1비함약혈청+DMEM배양,전대3차후용우실험.매일우도치현미경하관찰세포생장정황급형태변화,우배양제24,48,72,96,120소시용사서염법검측세포적증식정황(용흡광도표시),우배양1,2,3,4주말용감성린산매검측세포분화정황. 결과:60지대서균진입결과분석.①량조세포적생장곡선균정"S"형,재72,96,120 h시실험조세포균비대조조세포증식신속(흡광도치분별위0.213±0.021,0.192±0.032;0.341±0.031,0.274±0.021;0.401±0.016,0.325±0.014,P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01).②량조세포균시재제2주말시감성린산매활력체도고봉,제3주말개시하강.제2,3주말시실험조감성린산매활력현저대우대조조[(10.28±0.71),(7.41±0.53)nkat/L,P＜0.01;(8.81±0.76),(6.37±0.41)nkat/L,P＜0.05].③경하관찰실험조골수간충질간세포대량유도분화위성골세포,대조조성골세포수량、밀도명현저우실험조.결론:복방접골중약가이촉진체외배양적골수간충질간세포증식급향성골세포방향분화.
