细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2009年
5期
437-439,442
,共4页
罗勇%张阳德%彭健%颜焕新%薛敦%吴凯%周琳%韩世伟%赵劲风
囉勇%張暘德%彭健%顏煥新%薛敦%吳凱%週琳%韓世偉%趙勁風
라용%장양덕%팽건%안환신%설돈%오개%주림%한세위%조경풍
纳米磁流体%AFP%TK基因%GCV
納米磁流體%AFP%TK基因%GCV
납미자류체%AFP%TK기인%GCV
目的: 探讨纳米磁流体介导的重组质粒pEGFP-AFP-TK对AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2的杀伤作用.方法:通过纳米磁流体将构建好的重组质粒pEGFP-AFP-TK 并分别转染AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2 及AFP表达阴性肝癌细胞SMMC-7721,于荧光显微镜下动态观察;使用RT-PCR和Western blot分析HepG2 细胞中TK 基因的表达情况,MTT法检测转染重组TK表达质粒后的细胞在更昔洛韦(GCV)作用下的存活率并观察旁观者效应,用流式细胞术分析HepG2细胞的凋亡.结果:纳米磁流体能将重组质粒pEGFP-AFP-TK转入AFP阳性的HepG2 细胞,其转染效率高于脂质体;RT-PCR 及Western blot证明转染的AFP阳性的HepG2 细胞有TK基因的表达;MTT 及流式细胞术分析说明TK基因发挥杀伤细胞作用.结论:纳米磁流体能将重组质粒pEGFP-AFP-TK转染HepG2细胞并获得表达,可作为肝癌基因治疗的基因载体,采用AFP增强子可使目的基因在HepG2 细胞中特异性表达,并且在前药GCV的作用下,能使AFP表达阳性的肝癌细胞HepG2发生凋亡及旁观者效应.
目的: 探討納米磁流體介導的重組質粒pEGFP-AFP-TK對AFP錶達暘性的肝癌細胞HepG2的殺傷作用.方法:通過納米磁流體將構建好的重組質粒pEGFP-AFP-TK 併分彆轉染AFP錶達暘性的肝癌細胞HepG2 及AFP錶達陰性肝癌細胞SMMC-7721,于熒光顯微鏡下動態觀察;使用RT-PCR和Western blot分析HepG2 細胞中TK 基因的錶達情況,MTT法檢測轉染重組TK錶達質粒後的細胞在更昔洛韋(GCV)作用下的存活率併觀察徬觀者效應,用流式細胞術分析HepG2細胞的凋亡.結果:納米磁流體能將重組質粒pEGFP-AFP-TK轉入AFP暘性的HepG2 細胞,其轉染效率高于脂質體;RT-PCR 及Western blot證明轉染的AFP暘性的HepG2 細胞有TK基因的錶達;MTT 及流式細胞術分析說明TK基因髮揮殺傷細胞作用.結論:納米磁流體能將重組質粒pEGFP-AFP-TK轉染HepG2細胞併穫得錶達,可作為肝癌基因治療的基因載體,採用AFP增彊子可使目的基因在HepG2 細胞中特異性錶達,併且在前藥GCV的作用下,能使AFP錶達暘性的肝癌細胞HepG2髮生凋亡及徬觀者效應.
목적: 탐토납미자류체개도적중조질립pEGFP-AFP-TK대AFP표체양성적간암세포HepG2적살상작용.방법:통과납미자류체장구건호적중조질립pEGFP-AFP-TK 병분별전염AFP표체양성적간암세포HepG2 급AFP표체음성간암세포SMMC-7721,우형광현미경하동태관찰;사용RT-PCR화Western blot분석HepG2 세포중TK 기인적표체정황,MTT법검측전염중조TK표체질립후적세포재경석락위(GCV)작용하적존활솔병관찰방관자효응,용류식세포술분석HepG2세포적조망.결과:납미자류체능장중조질립pEGFP-AFP-TK전입AFP양성적HepG2 세포,기전염효솔고우지질체;RT-PCR 급Western blot증명전염적AFP양성적HepG2 세포유TK기인적표체;MTT 급류식세포술분석설명TK기인발휘살상세포작용.결론:납미자류체능장중조질립pEGFP-AFP-TK전염HepG2세포병획득표체,가작위간암기인치료적기인재체,채용AFP증강자가사목적기인재HepG2 세포중특이성표체,병차재전약GCV적작용하,능사AFP표체양성적간암세포HepG2발생조망급방관자효응.
