实用医学杂志
實用醫學雜誌
실용의학잡지
THE JOURNAL OF PRACTICAL MEDICINE
2010年
6期
907-909
,共3页
伍丽琼%吴翠玲%王娟%徐佳%邓鹏%姜勇
伍麗瓊%吳翠玲%王娟%徐佳%鄧鵬%薑勇
오려경%오취령%왕연%서가%산붕%강용
髓样相关蛋白8%血凝素类%转染%细胞内定位%载体构建
髓樣相關蛋白8%血凝素類%轉染%細胞內定位%載體構建
수양상관단백8%혈응소류%전염%세포내정위%재체구건
目的:构建小鼠髓样相关蛋白8(MRP8)的真核表达栽体,观察其在NIH3T3细胞中的表达定位情况.方法:提取BALB/c小鼠肝脏组织的总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应扩增得到MRP8编码序列,并将其克隆到带有血凝素(HA)标记的载体pcDNA3-HA上,随后将重组质粒瞬时转染NIH3T3细胞,利用荧光显微镜观察结果.结果:重组质粒经聚合酶链反应、酶切和测序鉴定证明构建正确,并且该质粒能够在NIH3T3细胞的胞浆、胞核中广泛表达,表达产物主要定位在细胞核中.结论:成功构建带有HA标签的MRP8真核表达载体.该载体能在哺乳动物细胞中有效表达并正确定位,为进一步研究MRP8作用细胞的信号通路提供了一个重要的工具.
目的:構建小鼠髓樣相關蛋白8(MRP8)的真覈錶達栽體,觀察其在NIH3T3細胞中的錶達定位情況.方法:提取BALB/c小鼠肝髒組織的總RNA,通過逆轉錄-聚閤酶鏈反應擴增得到MRP8編碼序列,併將其剋隆到帶有血凝素(HA)標記的載體pcDNA3-HA上,隨後將重組質粒瞬時轉染NIH3T3細胞,利用熒光顯微鏡觀察結果.結果:重組質粒經聚閤酶鏈反應、酶切和測序鑒定證明構建正確,併且該質粒能夠在NIH3T3細胞的胞漿、胞覈中廣汎錶達,錶達產物主要定位在細胞覈中.結論:成功構建帶有HA標籤的MRP8真覈錶達載體.該載體能在哺乳動物細胞中有效錶達併正確定位,為進一步研究MRP8作用細胞的信號通路提供瞭一箇重要的工具.
목적:구건소서수양상관단백8(MRP8)적진핵표체재체,관찰기재NIH3T3세포중적표체정위정황.방법:제취BALB/c소서간장조직적총RNA,통과역전록-취합매련반응확증득도MRP8편마서렬,병장기극륭도대유혈응소(HA)표기적재체pcDNA3-HA상,수후장중조질립순시전염NIH3T3세포,이용형광현미경관찰결과.결과:중조질립경취합매련반응、매절화측서감정증명구건정학,병차해질립능구재NIH3T3세포적포장、포핵중엄범표체,표체산물주요정위재세포핵중.결론:성공구건대유HA표첨적MRP8진핵표체재체.해재체능재포유동물세포중유효표체병정학정위,위진일보연구MRP8작용세포적신호통로제공료일개중요적공구.
