基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2010年
7期
721-725
,共5页
黄硕%余琳%汪洋%刘音%陈忠周
黃碩%餘琳%汪洋%劉音%陳忠週
황석%여림%왕양%류음%진충주
PHF8%原核表达%纯化%结晶
PHF8%原覈錶達%純化%結晶
PHF8%원핵표체%순화%결정
目的 探讨人PHF8蛋白的原核表达、纯化与结晶条件. 方法 用分子克隆的方法构建重组质粒PHFS/pet28b,测序鉴定正确后将其转入Rosetta 2(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白.对融合蛋白进行分离纯化结晶,衍射分析,并用计算机软件解析其晶体结构. 结果 经过诱导,含有PHF8/pet28b的Rosetta 2在原核表达系统中表达出了相对分子质量为40 ku的c-PHF8融合蛋白,c-PHF8在合适的悬滴条件下得到六方柱晶体. 结论 利用原核表达体系成功地表达了人PHF8催化活性中心结构域并获得结晶,为进一步的三维结构解析和PHF8功能研究奠定了基础.
目的 探討人PHF8蛋白的原覈錶達、純化與結晶條件. 方法 用分子剋隆的方法構建重組質粒PHFS/pet28b,測序鑒定正確後將其轉入Rosetta 2(DE3),IPTG誘導錶達融閤蛋白.對融閤蛋白進行分離純化結晶,衍射分析,併用計算機軟件解析其晶體結構. 結果 經過誘導,含有PHF8/pet28b的Rosetta 2在原覈錶達繫統中錶達齣瞭相對分子質量為40 ku的c-PHF8融閤蛋白,c-PHF8在閤適的懸滴條件下得到六方柱晶體. 結論 利用原覈錶達體繫成功地錶達瞭人PHF8催化活性中心結構域併穫得結晶,為進一步的三維結構解析和PHF8功能研究奠定瞭基礎.
목적 탐토인PHF8단백적원핵표체、순화여결정조건. 방법 용분자극륭적방법구건중조질립PHFS/pet28b,측서감정정학후장기전입Rosetta 2(DE3),IPTG유도표체융합단백.대융합단백진행분리순화결정,연사분석,병용계산궤연건해석기정체결구. 결과 경과유도,함유PHF8/pet28b적Rosetta 2재원핵표체계통중표체출료상대분자질량위40 ku적c-PHF8융합단백,c-PHF8재합괄적현적조건하득도륙방주정체. 결론 이용원핵표체체계성공지표체료인PHF8최화활성중심결구역병획득결정,위진일보적삼유결구해석화PHF8공능연구전정료기출.
