军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2010年
4期
331-333,344
,共4页
林方%熊伟%康晓平%李永强%刘洪%李辉%祝庆余%杨银辉
林方%熊偉%康曉平%李永彊%劉洪%李輝%祝慶餘%楊銀輝
림방%웅위%강효평%리영강%류홍%리휘%축경여%양은휘
人类流感病毒%病毒分型%多重PCR
人類流感病毒%病毒分型%多重PCR
인류류감병독%병독분형%다중PCR
目的 建立一种可以同时检测人类A型流感病毒,B型流感病毒及A型流感病毒H1,H3,H5亚型的多重RT-PCR方法.方法 根据人类流感病毒的特异性基因设计并合成多对特异性引物,建立可同时扩增出人类流感病毒亚型特异性片段的多重PCR的方法.同时,对该方法的特异性和敏感性进行了评价,并利用该方法对39份疑似swine H1N1的临床标本进行检测.结果 该方法可同时扩增出A型流感病毒M基因203 bp,B型流感病毒M基因296 bp,A型流感病毒亚型的HA基因片段长度分别为362 bp(H1),112 bp(H3),188 bp(H5),494 bp(swine H1).该实验最低可检测新甲型H1N1 (A/Beijing/501/2009)病毒RNA 0.5TCID50.该方法的特异性实验结果显示,在多重PCR检测中未检出非特异扩增的PCR产物.同时,使用该方法从39份疑似新甲型H1N1的临床咽拭子标本中检测出新甲型H1N1阳性的标本4份(10.2%),季节性H1N1亚型2份(5.1%),H3N2亚型12份30.7%,本次实验结果与WHO通过实时PCR方法检测的结果一致.结论 本研究建立的多重PT-PCR方法快速、敏感,特异性强,可用于人类流感病毒的分型检测.
目的 建立一種可以同時檢測人類A型流感病毒,B型流感病毒及A型流感病毒H1,H3,H5亞型的多重RT-PCR方法.方法 根據人類流感病毒的特異性基因設計併閤成多對特異性引物,建立可同時擴增齣人類流感病毒亞型特異性片段的多重PCR的方法.同時,對該方法的特異性和敏感性進行瞭評價,併利用該方法對39份疑似swine H1N1的臨床標本進行檢測.結果 該方法可同時擴增齣A型流感病毒M基因203 bp,B型流感病毒M基因296 bp,A型流感病毒亞型的HA基因片段長度分彆為362 bp(H1),112 bp(H3),188 bp(H5),494 bp(swine H1).該實驗最低可檢測新甲型H1N1 (A/Beijing/501/2009)病毒RNA 0.5TCID50.該方法的特異性實驗結果顯示,在多重PCR檢測中未檢齣非特異擴增的PCR產物.同時,使用該方法從39份疑似新甲型H1N1的臨床嚥拭子標本中檢測齣新甲型H1N1暘性的標本4份(10.2%),季節性H1N1亞型2份(5.1%),H3N2亞型12份30.7%,本次實驗結果與WHO通過實時PCR方法檢測的結果一緻.結論 本研究建立的多重PT-PCR方法快速、敏感,特異性彊,可用于人類流感病毒的分型檢測.
목적 건립일충가이동시검측인류A형류감병독,B형류감병독급A형류감병독H1,H3,H5아형적다중RT-PCR방법.방법 근거인류류감병독적특이성기인설계병합성다대특이성인물,건립가동시확증출인류류감병독아형특이성편단적다중PCR적방법.동시,대해방법적특이성화민감성진행료평개,병이용해방법대39빈의사swine H1N1적림상표본진행검측.결과 해방법가동시확증출A형류감병독M기인203 bp,B형류감병독M기인296 bp,A형류감병독아형적HA기인편단장도분별위362 bp(H1),112 bp(H3),188 bp(H5),494 bp(swine H1).해실험최저가검측신갑형H1N1 (A/Beijing/501/2009)병독RNA 0.5TCID50.해방법적특이성실험결과현시,재다중PCR검측중미검출비특이확증적PCR산물.동시,사용해방법종39빈의사신갑형H1N1적림상인식자표본중검측출신갑형H1N1양성적표본4빈(10.2%),계절성H1N1아형2빈(5.1%),H3N2아형12빈30.7%,본차실험결과여WHO통과실시PCR방법검측적결과일치.결론 본연구건립적다중PT-PCR방법쾌속、민감,특이성강,가용우인류류감병독적분형검측.
